Microbiología: “técnicas de aislamiento bacteriano”

Universidad de Concepción
Facultad de Biología
Departamento Microbiología

Práctico Nº2:

“Técnicas de aislamiento bacteriano”




Nombre: Freddy Spaudo Bravo
Carrera: Ingeniería Ambiental
Fecha Entrega: 11 deSeptiembre 2012
Profesor: Homero Urrutia
Ayudantes: Boris Parra
Jonathan Lara
Introducción:

En este laboratorio aplicamos las diferentes técnicas para el aislamientobacteriano, empleadas para separar un microrganismo a partir de una población. En hábitats naturales raramente encontramos a los microrganismos en cultivo puro (un solo tipo de microrganismo), por lo tanto es necesario hacer algún procedimiento de aislamiento para separar los distintos tipos de microrganismos presentes para luego así poder identificarlos.
Para realizar la actividad, usamos dos técnicasde aislamiento que pueden emplearse en forma individual o en combinación. Estas fueron: Por diseminación en superficie y Aislamiento en medios selectivos.

Metodología

1.- Aislamiento por diseminación en superficie

El medio de cultivo utilizado para este método es Agar Tripticasa (o agar R2A). Se procedió a tomar un asa curva, luego se procedió a esterilizarlo sobre la llama del mechero,después se tomó una muestra del cultivo líquido con diferentes tipo de microrganismos (Fig.Nº1). Luego se procedió a trazar líneas en el Agar Tripticasa de forma delicada cuidando de no romper este medio de cultivo. El primer trazo se realizó de forma muy continua y junta, a continuación se giró la placa de Petri 45° para realizar un segundo trazo con líneas un poco más separadas (Fig. Nº2), ypor último, un trazo continúo con las líneas más separadas, para que en este último trazo aparecieran colonias independientes unas de otras. Después de haber trazado las líneas, la cápsula con la diseminación del cultivo (Fig.N°3) se llevó a incubación a 30ºC.Fig.N°1 Fig.N°2 Fig.N°3

2.- Aislamiento en Medios Selectivos

Este método de cultivo se realizó la misma técnica utilizada en la diseminación por superficie pero en diferentes medios. Estos fueron: Agar Cristal Violeta (Fig.Nº4), Agar McConkey (Fig.Nº5) yAgar Telurito de K (Fig.Nº6). Se denominan medios selectivos porque poseen características específicas para que un solo tipo de bacteria (Gram +/-) crezca en este medio.
Los medios selectivos son aquellos que favorecen por su composición el crecimiento específico de un microrganismo particular o grupo de microrganismos. Es de gran utilidad para el aislamiento de microrganismos a partir de unapoblación microbiana mixta.
El medio variará dependiendo del tipo de microrganismo. Cada medio tiene distintos componentes como su composición química, estado físico, origen de sus componentes y pH, formando así un medio totalmente específico para el crecimiento de la bacteria para la cual fue desarrollada además de inhibir el crecimiento de otras.Fig.N°4 Fig.N°5 Fig.N°6

Los diferentes medios de cultivos y algunas características:

Agar Tripticasa: Es una mezcla compleja de sales de polisacáridos, fundamentalmente, galactósidos. Las grandes moléculas que lo constituyen determinan sus cualidades sobresalientes, como coloides y espesantes, que lo han...