microbiologia

Los antibióticos son compuestos orgánicos de bajo peso molecular sintetizados por microorganismos, que a bajas concentraciones inhiben el desarrollo o matan a otros microorganismos. Se caracterizan por:
-Inhiben el crecimiento (bacteriostáticos) o matan (bactericidas).
-Son efectivos a bajas concentraciones.
-Poseen toxicidad selectiva: actúan sobre el patógeno sin afectar al organismohospedador.
-Pueden actuar frente a procariotas o eucariotas.
-Pueden ser de acción muy específica o de amplio espectro.
-Solubles en agua.
-Poseen estabilidad química.
-Son productos del metabolismo secundario.
Es importante tener en cuenta la posibilidad de aparición de resistencia a determinados antibióticos en algunos microorganismos durante el tratamiento de una infección.
Losmicroorganismos productores se encuentran tanto dentro del grupo de procariotas (Bacillus, Streptomyces, Nocardia) como en el de eucariotas (Penicillium, Aspergillus,
Cephalosporium)
Se pueden clasificar según:
Su origen
•Naturales: sintetizados por microorganismos.
•Sintéticos: obtenidos completamente por síntesis química.
•Semisintéticos: parte de compuesto sintetizada por microorganismos y otra partesintetizada químicamente.
Su estructura química
•ß-lactámicos: penicilinas , cefalosporinas.
•Macrólidos: eritromicina.
•Aminoglucósidos: estreptomicina.
•Polipeptídicos: bacitracina.
•Poliénicos: anfotericina B
•Tetraciclinas
•Derivados del benceno: cloranfenicol.

Su mecanismo de acción
•Actúan sobre la pared celular bacteriana inhibiendo su síntesis: penicilinas.
•Actúan sobre lamembrana celular alterando su permeabilidad.
•Inhiben la síntesis proteica.
•Inhiben la síntesis de ácidos nucléicos: mitomicina.

El antibiograma:
Se utiliza para comprobar cuál de una serie de antibióticos es más activo frente a un determinado microorganismo. Esta prueba será aplicada a diferentes bacterias obtenidas y conservadas de muestras analizadas en las prácticas anteriores. Secompararán una serie de 12 antibióticos proveídos comercialmente, con especificidad hacia bacterias Gram negativo. Para lo anterior se seguirá la técnica de siembra masiva en superficie del microorganismo de prueba.



Objetivo
El alumno aprenderá a utilizar los antibiogramas para la caracterización de bacterias con respecto a su respuesta a antibióticos.

Material
Cepa bacteriana purificadaTubos de ensaye con solución isotónica o salina al 2.5%
Cotonetes estériles
Placas de agar soya tripticasa (TSA)
Placas con agar Mueller-Hinton (una por cada cepa a probar)
Multidiscos con antibióticos (multidiscos Gram negativo BIORAD)
Incubadora

Procedimiento
1.-Tomar una colonia de un cultivo puro de la bacteria a evaluar. El cultivo debe ser de entre 18-24 horas de incubación y crecidoen un agar no selectivo. Se prefiere al agar soya tripticasa, ya que no contiene elementos que pudieran inhibir la actividad de los antibióticos.
2. Tomar con un palillo de madera estéril una porción de una colonia aislada y suspenderla en un tubo de ensaye que contiene 10 mL solución isotónica de cloruro de sodio (0.85% de cloruro de sodio. Si la muestra es de origen marino, la solución diluentedeberá contener un 2.5% de cloruro de sodio), estéril, hasta alcanzar una concentración equivalente al estándar de 0.5 McFarland (estándar de cloruro de bario), por medio de una comparación visual, lo cual daría una concentración aproximada de 10 8 UFC/mL. Una solución a la carencia del estándar de cloruro de bario es por medio del uso de leche de magnesia (cloruro de magnesio) comercial. En estecaso, se toma un palillo de dientes de madera redondo preferentemente, y se traza una marca de un centímetro en uno de los extremos. Entonces el palillo es sumergido hasta la marca en la suspensión de magnesia, se retira y se introduce en un tubo de ensayo con la misma solución y volumen en donde se colocará la bacteria La suspensión formada entonces es equivalente a la de estándar de cloruro de...