microbiologia

CONSERVACIÓN Y CONTROL DE CEPAS MICROBIANAS

Aislamiento de un nuevo mo: Dos acciones
• International Journal of Systematic Bacteriology (IJSB).
• Publicación oficial de registro para la taxonomía y clasificación de los

mo.
» Descripción nuevo mo, nombre propuesto .
• Después publicación, inclusión : Bergey´s Manual.
• Taxonomía de procaritas.
» Incluida, cuando es oficialmenteaceptada la nueva especie
• American type Culture collection ATCC (Colección americana de cultivos

tipo).
• Deutsche Samlung von Mikroorganismen und Zellkulturen ( DSM; Collección
alemana de microorganismos y cultivos celulares)
• Depositar un cultivo axénico/ cepa tipo, patrón de comparación.
• Cultivos congelados o liofilizados..

Colección de Cultivo y servicio que ofrece
¿Qué son lasColecciones de Cultivo?
- Organizaciones, ocupan de guardar convenientemente:
 cepas de microorganismos,
células superiores o
diversos materiales biológicos:
Los suministran, previa petición, a laboratorios microbiológicos
o de biología celular.

Normas generales para la conservación de
cepas microbianas

Los tres objetivos para una correcta conservación:
1.-Mantenimiento enCultivo puro. (PUREZA)
2.-Que este viva. (VIABILIDAD)
3.- Mantenerse genéticamente estable (ESTABILIDAD)

La conservación de cepas
microbianas
• Método de elección o de conservación a largo
plazo
– Conservación por congelación
– Conservación por liofilización

• Métodos a corto plazo
– RESIEMBRA: Refrigeración, transferencia periódica,

• Métodos Alternativos (Restringidos)
–
–
–
–Desecación en papel de filtro
Desecación en suelos, arena, silica gel, etc
Desecación en bolitas de alginato
Desecación en sal gorda para halobacterias

La conservación de cepas
microbianas
• Método de elección o de conservación a largo
plazo
– Conservación por congelación
– Conservación por liofilización

• Métodos Corto Plazo.
– Conservación por transferencia periódicaConservación de microorganismos por
congelación
La crió conservación
•Conservación mo. temperaturas inferiores a cero grados centígrados.

• PRINCIPIO: Disminución metabolismo celular , por la disminución
del agua disponible.
 Objetivos:
- Mantenimiento

de la viabilidad

-Crioprotectores
-La temperatura de almacenamiento
-El estado fisiológico de la célula

- Mantenimiento de laestabilidad
- Mantenimiento de la pureza

Hielo
Hielo
Hielo
H2O

BACTERIA

Hielo

H2O

H2O

Hielo

Hielo

H2O

Hielo

Hielo

AGENTES
CRIOPROTECTORES
• OBJETIVOS
– Minimizar daño celular , durante
la congelación.
• Limitar la formación de hielo (tasa de
congelación)
• Vitrificación del agua

– VITRIFICACION.
• Al ser enfriada no cristaliza, sino que se
tornaviscosa
• pasa del estado líquido a un estado sólido
no estructurado similar al vidrio.

• CARACTERISTICAS
– No tóxico.
– Penetrar fácilmente en la
membrana celular.
– Unirse a las moléculas de
agua.

Crioprotectores más comunes
•
•
•
•
•
•
•
•

Glicerol
Dimetilfulfóxido (DMSO)
Ácido glutámico
Glucosa
Sacarosa
Meso inositol
Lactosa
Leche Descremada

Conservación demicroorganismos por
congelación
Objetivos de la crio-conservación:
- Mantenimiento de la viabilidad
-crioprotectores
-La temperatura de almacenamiento (-20 ;-70º,-180º)
Variaciones de la temperatura sean rápidas, tanto para la congelación como para la
descongelación, por lo que para descongelar conviene poner las células a 37ºC.

-El estado fisiológico de la célula (Final f.logarítmica)(Crecer los cultivos a conservar: mitad o final fase log.
- Mantenimiento de la estabilidad
- Mantenimiento de la pureza

Conservación de microorganismos por
congelación
Objetivos de la crioconservación
- Mantenimiento de la viabilidad
-crioprotectores
-La temperatura de almacenamiento
-El estado fisiológico de la célula
- Mantenimiento de la estabilidad (fenotípica y genotípica)
-...