Micropipetas

VERIFICACIÓN DEL USO Y FUNCIONAMIENTO ADECUADO DE MICROPIPETAS.
INTRODUCCIÓN.
La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas. Los volúmenes captables por estos instrumentos varían según el modelo: los más habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un máximo de20, 200 y 1000 μl, respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plástico, que habitualmente son estériles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volúmenes pequeños (por ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear volúmenes grandes (porejemplo, 800 μl).

Recomendaciones para el uso fiable de la micropipeta

Existen algunos aspectos claves que no dependen de la técnica de pipeteo que se escoja y a los cuales hay que prestarle especial atención:

•Se debe elegir la micropipeta de modo que el volumen a dispensar sea lo más cercano posible al volumen máximo posible para la micropipeta en cuestión.
•Los tips no deben sumergirsemuy profundo en el líquido, sino solamente 2-3 mm bajo la superficie.
•Los tips deben tocar el recipiente donde se dispensa el líquido.
•Humedecer los tips 2-3 veces antes de dispensar, esto incrementa la exactitud y precisión de la medición.
•Mantener la micropipeta en una posición tan vertical como sea posible, nunca en ángulo.
•La aspiración debe realizarse lentamente y uniformemente, nodemasiado rápido.
•No presionar el tip muy fuerte al cono de la micropipeta.
•La temperatura de la micropipeta, la punta, el líquido y la habitación debe estar en equilibrio.
•El mantenimiento regular y el chequeo de la calibración garantiza que la micropipeta opere de acuerdo a las especificaciones.

Ejemplo de la influencia de las condiciones ambientales
La temperatura, la humedad y lapresión del aire son fuentes de error provenientes de las condiciones ambientales. De todas ellas, la temperatura es la principal fuente de error. Por ejemplo: un incremento de la temperatura del líquido manipulado desde 5 ºC a 28 ºC mientras la temperatura de los otros elementos (micropipeta, punta, habitación) permanece constante a 22 °C, puede introducirse un error de hasta 6 % de error del volumendispensado.

OBJETIVOS.
* Determinar las posibles variaciones en el uso de la micropipeta.
* Verificación de la exactitud y precisión de las micropipetas.
RESULTADOS.
VERIFICACIÓN DE EXACTITUD Y PRESCISIÓN CON DICROMATO DE POTASIO POR UN METODO FOTOMETRICO.
Tubos | Abs. 500nm. | | | |
1 | 0.259 | | | |
2 | 0.261 | | | |
3 | 0.262 | | Media | 0.262 |
4 | 0.259 | |Desv. Estandar | 0.013 |
5 | 0.27 | | C.V.% | 4.997% |
6 | 0.266 | | | |
7 | 0.265 | | | |
8 | 0.262 | Volumen que mide la pipeta en µl.
| | Abs promedio x VNP
|
9 | 0.27 | | | Abs del estándar relativo
|
10 | 0.259 | | | |
11 | 0.259 | VNP=valor nominal de la micropipeta=10µl. Abs promedio= 0.262 Abs del estándarrelativo =0.266

| | |
12 | 0.263 | | | |
13 | 0.264 | | | |
14 | 0.271 | | | |
15 | 0.272 | | Volumen que mide la pipeta en µl.
| |
16 | 0.273 | | | 9.83µl
|
17 | 0.264 | | | |
18 | 0.268 | | | |
19 | 0.21 | | | |
20 | 0.26 | | | |

% Error= (Valor observado – Valor Real / Valor Real) x 100
%Error= (9.83µl. - 10 µl. / 10µ)x 100
%Error= -1.70 %

VERIFICACIÓN DE EXACTITUD Y PRESCISIÓN CON AGUA POR UN METODO GRAVIMETRICO.

# Mediciones | Masa H₂O (g.) | | | |
1 | 0.0099 | | | |
2 | 0.0099 | | | |
3 | 0.0098 | | Media | 0.0099 |
4 | 0.01 | | Desv. Estandar | 0.0002 |
5 | 0.0099 | | C.V.% | 1.6949% |
6 | 0.0099 | | | |
7 | 0.0098 | Volumen que mide la pipeta en µl.

| | |
8 | 0.0101 | | |...