Microscopia

1. Microscopia

Invento del microscopio da origen a la biología celular.
1590: Z. Janssen y H. Janssen crean el primer microscopio óptico.
Roberto Hooke: observa primera células.
Antonie VanLeeuwwenhoek: observa la estructura de las células.
1930: crean el microscopio electrónico, 100 veces más eficaz.

Formación de la imagen:
1. Fuente de luz / Haz de electrones
2. Muestra
3. Sistemade lentes / electroimanes.
a. Se forma por interferencia debido a la difracción
i. Apertura angular: 70º para mejor agudeza
ii. Resolución: capacidad para distinguir 2 objetos adyacentes comoobjetos separados, está determinado por:
1. Longitud de onda
2. Apertura angular
3. Índice de refracción del medio que rodea la muestra
Luz visible: 400-700 nanómetros
Microscopio óptico: 200nanómetros (*1000 en seco / *1400 en aceite de inmersión)
Microscopio electrónico: 2 nanómetros (*100,000)

Microscopio de campo claro

Microscopia de campo claro: muestras con color
Muestra queafecten la luz
Microscopia de contraste de fases: células intactas y vivas
No corta ni tiñe muestras
Diferencias de grosor e índices de refracción
Transforma alteraciones de fase encambios de brillo
Microscopia de contraste de interferencia diferencial (DIC): parecido al anterior
Utiliza un prisma para separar el haz de luz en 2, al recombinarse muestra la diferencia de fases.Necesita: polarizador, analizador y 2 prismas de Wollanston
Microscopia de fluorescencia: absorber luz y emitirla más débil
Mayor longitud de onda = menor energía
Localiza moléculas dentro de lacélula
Filtro de excitación: solo permite el paso de luz UV
Muestra emite luz más débil (luz visible)
Filtro barrera: elimina la luz UV
Sonda fluorescente: molécula que emite luzfluorescente e indica presencia de moléculas
Inmuno-fluorescencia: anticuerpos marcados se unen a antígenos
Microscopia confocal: utiliza haz de luz laser
Produce la imagen de un único plano de...