Moléculas orgánicas

U.T. 2 - EQUIPOS Y TÉCNICAS
DE VISUALIZACIÓN DE
MICROORGANISMOS

Tema 4: Microscopio óptico

Introducción
La microbiología requiere observar microorganismos

Introducción
Limitaciones del ojo humano:
no puede enfocar los objetos a menos de 25cm de
distancia
necesita que el ángulo entre objeto-ojo sea ≥ 1°

Esto significa que no podemos percibir objetos
menores de 0,1 mm.Introducción
Primeros microscopios:

Fueron construidos, en el s. XVII, por Antonie van
Leeuwenhoek. Algunos llegaban a 300 aumentos y le
permitieron observar y describir muchos tipos de células
(espermatozoides, protozoos, ... ).

Introducción
Ventajas del microscopio:
Permite amplificar mediante lentes
Son lentes plano convexas que funcionan como un conjunto de
prismas. Cuando la luzincide sobre ellas se desvía hacia dentro,
convergiendo en un punto (punto focal de la lente) y a partir de
éste divergen creando una imagen aumentada e invertida.

Introducción
Las características ópticas de una lente:
distancia focal de la lente (distancia entre el centro de
la lente y el punto focal)
diámetro de la lente o luminosidad, que determina su
capacidad para recoger luz.Introducción
Ventajas del microscopio:
Crea contraste entre objeto-medio circundante para que se perciba con nitidez.
Tiene poder de resolución - suficiente para que
percibamos diferenciados objetos muy próximos.

Introducción

Microscopio
óptico de
campo
luminoso

Elementos de un microscopio óptico

Microscopio óptico
Para crear la imagen consta de tres
sistemas separados delentes:
Condensador - situado entre la fuente de luz y la
muestra, rectifica los rayos de luz en el plano del
microscopio.
Objetivo - amplía la imagen del campo del
microscopio.
Ocular - amplía más la imagen del objetivo y
permite que sea percibida por el ojo.

Microscopio óptico
Tanto la lente del ocular como la del objetivo están diseñadas
para reducir al mínimo los efectos ópticosinherentes:
aberración esférica (no pueden enfocar a la vez todo el
campo del microscopio)
y aberración cromática (producen irisaciones alrededor de
los objetos que están en el campo del microscopio).
Según el sistema de iluminación podemos diferenciar cinco tipos
de microscopios ópticos:
Estos tres son los más usados en microbiología
De campo luminoso
De campo oscuro
De contraste defases
De luz ultravioleta
De fluorescencia

Microscopio óptico de campo luminoso
Se caracteriza porque el fondo está intensamente
iluminado y los objetos se perciben oscuros.
Permiten aumentos útiles de 1000x - 1200x
En la estructura de un microscopio de campo luminoso
podemos diferenciar dos partes fundamentales y en cada
una de ellas diferentes componentes:
1. El soporte mecánico
2. Laparte óptica

Microscopio óptico de campo luminoso
El soporte mecánico- está formado por:
PIE O BASE, que da estabilidad al
microscopio
BRAZO, que articula con el pie.
TUBO ÓPTICO, que lleva las lentes oculares
en la parte superior y los objetivos en una
pieza giratoria o revólver en la parte inferior.
PLATINA, es la plataforma sobre la que se
colocan las preparaciones. Un carro móvilpermite desplazar el portaobjetos en sentido
transversal y vertical.
MACROMÉTRICO y MICROMÉTRICO, son
tornillos de enfoque, mueven la platina hacia
arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace
de forma rápida (enfoque grosero) y el
micrométrico de forma lenta (enfoque fino).
Llevan incorporado un mando de bloqueo que
fija la platina a una determinada altura.

Microscopio óptico decampo luminoso
La parte óptica- formado por:
OCULARES –
Microscopio monoculares: tiene un solo
ocular
Microscopio binocular: dos oculares.
Microscopios trioculares: incorporan un
tercer ocular que permite acoplar una
cámara fotográfica o de vídeo.

El aumento de la lente viene indicado en
cada uno de ellos: x8, x10, x12, ... Algunos
oculares incluyen una escala micrométrica
para medir...