Método De Filtración Por Membrana

METODO DE FILTRACION POR MEMBRANA

Consiste en determinar el número de coliformes totales, fecales y streptos fecales mediante la filtración de volúmenes determinados del agua a analizar, enfiltros de membrana, e incubación sobre medios de cultivo a temperaturas adecuadas.


Material:
· Mechero
· Pinzas estériles
· Rampa de filtración
· Soportes de filtración
· Bomba de vacío.
·Filtros estériles
· Pipetas estériles
· Agua destilada estéril en un frasco de 1l
· Frascos con 99ml, 90ml de agua destilada estéril
· Placas con medio de cultivo ENDO, MFC , Slanezt Bartley
· Estufasa 37ºC y a 44ºC.

COLIFORMES TOTALES

Los elementos de filtración que vayan a entrar en contacto con el agua a analizar deben estar estériles.
- Se coloca el filtro estéril sobre el soportede filtración con pinzas estériles.
- Se realiza la dilución añadiendo 1ml del agua problema a un frasco con 99ml de agua destilada previamente esterilizado.Se homogeniza bien la mezcla agitandovarias veces
- Se filtran los 100ml de agua (en 3 veces) efectuando el vacío necesario.
- Se transfiere el filtro a un medio de cultivo sólido, en este caso Agar ENDO, contenido en una placade petri de 60mm, de modo que la superficie de filtración quede arriba.
- A continuación se incuba a 37ºC durante 24 horas.
Lectura:

La prueba positiva de coliformes totales se determina porla aparición en el medio de colonias de color púrpura o con brillo metálico ( E.Coli ).
El resultado se dará como coliformes totales por el factor de dilución en 100ml de agua.
.Numero de colonias x factor de dilución / 100ml

COLIFORMES FECALES

Se sigue el mismo procedimiento que los coliformes totales, con la salvedad de que el medio utilizado es M FC, y latemperatura de incubación son 44º C 24 horas.
Las colonias son de color azul.
El resultado se dará como coliformes fecales por el factor de dilución en 100ml de agua.

Numero de...