métodos de esterilización y controles







I


















OBJETIVO:
Que el alumno prepare material de uso común en un laboratorio de microbiología para su esterilización y analice los diferentes métodos para seleccionar el más adecuado acorde a la naturaleza del material, haciendo uso de controles de esterilización.

INTRODUCCIÓN:
La esterilización es un tratamiento que deja al objeto tratadolibre de todo microorganismo vivo. Puede lograrse mediante exposición a agentes letales físicos o químicos, o en el caso de las disoluciones, por filtración. El único criterio valido de muerte en el caso de un microorganismo es la perdida irreversible de la capacidad de reproducirse (Stanier y cols., 1992).
Esterilización por calor.
Es el agente letal más ampliamente utilizado para laesterilización. Los objetos pueden ser esterilizados por calor seco, aplicado en un horno de atmosfera de aire o por calor húmedo, que proporciona el vapor caliente. De estos dos métodos la esterilización por calor seco requiere una duración e intensidad mucho mayores porque la conducción del calor es mucho menos rápida en aire seco que en aire húmedo. Por consiguiente la tasa de muerte es mucho más baja parala células desecadas que para las hidratadas. (Stanier y cols., 1992).
Esterilización por tratamiento químico.
Muchas de las sustancias usadas para preparar medios de cultivo son demasiado lábiles frente al calor para ser esterilizadas en la autoclave. Para tales sustancias resultaría extremadamente útil un método químico fiable de esterilización. El mejor candidato disponible es el dióxido deetileno, sin embargo es químicamente inestable y se descompone en solución acuosa dando etilenglicol, que no es volátil y puede tener efectos no deseables, además el oxido de etileno es explosivo y toxico para los seres humanos por lo que es preciso adoptar precauciones especiales para su manejo. (Stanier y cols., 1992).

Esterilización por filtración:
El principal método de laboratorioutilizado para esterilizar disoluciones de materiales termolábiles es a través de filtros capaces de retener los microorganismos, estos quedan retenidos en parte por los pequeños poros del tamaño del filtro y en parte por la adsorción a las paredes de los poros durante su paso a través del filtro. La importancia de la adsorción está indicada por el hecho de que un filtro puede retener eficazmentemicroorganismos aun cuando el tamaño medio del diámetro de los poros sea algo mayor que el tamaño medio de las células que son retenidas. (Stanier y cols., 1992).

RESULTADOS:
Las condiciones que se mantuvieron en la incubadora fueron 37°C durante 18 horas de incubación. Los resultados arrojados después de las observaciones son las siguientes:
Calor seco
Se prepararon los tubos de ensayopreviamente sellados con tapones de gasa y algodón y encima el papel aluminio ; los matraces también con tapones de gasa pero encima un gorro de papel kraft, para introducirlos al horno a 160°C,al momento de abrir el horno ,empezó a bajar la temperatura por lo que se introdujo el material lo más rápido posible y se determinó esperar a que la temperatura subiera otra vez para empezar a contarla hora .Es importante mencionar que se les colocó un pedazo de cinta testigo .Al pasar la hora los materiales fueron retirados del horno con el mayor cuidado posible para que no ocurriera algún accidente. Al observar el material, se pudo apreciar que la cinta testigo había cambiado de color blanco a un color café claro casi imperceptible, los tapones de gasa cambiaron a un color café.Determinando que el material había sido esterilizado, lo cual pudo comprobarse gracias al cambio de color de la cinta testigo.


Calor húmedo:
Se sellaron los materiales respectivamente con los tapones de algodón y gorros de papel kraft, también se les agrego un pedazo de cinta testigo. Se revisó que la autoclave necesitaba agua, por lo que se dispuso a colocarle el nivel adecuado. Se espero a...