Nada
Páginas: 11 (2645 palabras)
Publicado: 7 de octubre de 2011
AISLAMIENTO DE TEJIDO VEGETAL
Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Agronomía.
Andrés Felipe Mon Muñoz (716687)
Jazmín Borda Araujo (716685)
Mónica Vanessa Gómez Talero (716730)
INTRODUCCIÓN
En el desarrollo productivo de diferentes cultivos se ha observado constantemente distintas manifestaciones de enfermedades, provocando perdidas económicas y alterando el sistemasocial de las comunidades, por tal razón la microbiología y en especial la fitopatología se ha encargado de estudiar los agentes causantes de este fenómeno, aislándolos y estudiando el crecimiento de los mismos en medios controlados.
A través de estudios ya realizados se comprobó que los principales patógenos causantes de enfermedades en plantas son los virus, bacterias, hongos y nematodos loscuales realizan una parte o todo su ciclo de vida dentro de las plantas y funcionamiento normal de las mismos; en especial estos patógenos tienen diferentes expresiones ya sea acabando con los tejidos celulares de las plantas o captando sus nutrientes sin destruirlas (López, 2007).
Es de resaltar que los hongos pueden ser parásitos obligados que dependen enteramente de su capacidad decolonización para completar su ciclo de vida, por esto en el presente informe se quiere observar el comportamiento del hongo Botrytis sp. el cual se desarrolla en las rosas, por ende lo que se quiere lograr es aislar este patógeno por medio de un trozo de hoja que ha pasado por diferentes tiempos de esterilización y así observar e identificar el crecimiento del mismo en un medio de cultivo PDA.
MATERIALESY METODOS
* 50ml etanol al 70%
* 50ml clorox al 1%
* 50ml de agua destilada estéril
* Pinzas
* Alcohol industrial
* Tejido vegetal con lesiones ocasionadas por enfermedad
* Cajas petri con medio PDA
* Mechero
* Cámara de flujo de aire laminar
Hay que tener en cuenta que antes de realizar esta práctica se deben tomar algunas medidas para que la muestra notenga contaminación alguna, como lo son: lavarse bien las manos, desinfectar el área de trabajo con etanol, trabajar cerca de un mechero, todas las transferencias deben hacerse con pinzas estériles y todo trabajo de desinfección y siembra se debe hacer dentro de la cámara de flujo.
Cortar 5 segmentos y realizar un lavado de desinfección con la solución de alcohol al 70% durante 30 segundosSeleccionar material vegetal que presente tejido dañado y tejido sano.
Tomar resultados y evaluar
Transferir los pedazos desinfectados a la solución de clorox al 3% durante 1-5 minutos con un movimiento constante
Colocar en la cámara de crecimiento
Tomar un trozo de material afectado y dejarlo en solución desinfectante un minuto, se procede con el otro y se deja 2 min, otro 3 min, otro 4y el último 5 min.
Marcar y sellar las cajas petri con vinipel
Transferir asépticamente los segmentos vegetales a la caja petri con medio PDA
Hacer otra muestra con el mismo tejido vegetal, siguiendo el mismo procedimiento y de igual forma se transfieren los segmentos a medio de PDA
Se procede a realizar cuatro enjuagues con agua destilada estéril con movimiento constante durante 2min (cada lavado).
Grafica 1. Proceso llevado a cabo para el aislamiento de Botrytis cinérea.
RESULTADOS
En la primera muestra se puede observar crecimiento alrededor del tejido vegetal, en la quinta división mostrando la presencia de un hongo, en este caso de Botrytis cinérea y las demás divisiones no presentaron resultado alguno exceptuando ciertos contaminantes en baja proporción.Figura 1. Muestra uno aislamiento de Botrytis sp
La segunda muestra presento crecimiento de organismos los cuales se consideran como contaminantes, la única presencia del patógeno se presento en la segunda división.
Figura 2. Muestra dos, replica aislamiento de Botrytis sp con humedad
MARCO TEORICO
A través de la historia se han desarrollado diferentes técnicas para identificar...
Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Agronomía.
Andrés Felipe Mon Muñoz (716687)
Jazmín Borda Araujo (716685)
Mónica Vanessa Gómez Talero (716730)
INTRODUCCIÓN
En el desarrollo productivo de diferentes cultivos se ha observado constantemente distintas manifestaciones de enfermedades, provocando perdidas económicas y alterando el sistemasocial de las comunidades, por tal razón la microbiología y en especial la fitopatología se ha encargado de estudiar los agentes causantes de este fenómeno, aislándolos y estudiando el crecimiento de los mismos en medios controlados.
A través de estudios ya realizados se comprobó que los principales patógenos causantes de enfermedades en plantas son los virus, bacterias, hongos y nematodos loscuales realizan una parte o todo su ciclo de vida dentro de las plantas y funcionamiento normal de las mismos; en especial estos patógenos tienen diferentes expresiones ya sea acabando con los tejidos celulares de las plantas o captando sus nutrientes sin destruirlas (López, 2007).
Es de resaltar que los hongos pueden ser parásitos obligados que dependen enteramente de su capacidad decolonización para completar su ciclo de vida, por esto en el presente informe se quiere observar el comportamiento del hongo Botrytis sp. el cual se desarrolla en las rosas, por ende lo que se quiere lograr es aislar este patógeno por medio de un trozo de hoja que ha pasado por diferentes tiempos de esterilización y así observar e identificar el crecimiento del mismo en un medio de cultivo PDA.
MATERIALESY METODOS
* 50ml etanol al 70%
* 50ml clorox al 1%
* 50ml de agua destilada estéril
* Pinzas
* Alcohol industrial
* Tejido vegetal con lesiones ocasionadas por enfermedad
* Cajas petri con medio PDA
* Mechero
* Cámara de flujo de aire laminar
Hay que tener en cuenta que antes de realizar esta práctica se deben tomar algunas medidas para que la muestra notenga contaminación alguna, como lo son: lavarse bien las manos, desinfectar el área de trabajo con etanol, trabajar cerca de un mechero, todas las transferencias deben hacerse con pinzas estériles y todo trabajo de desinfección y siembra se debe hacer dentro de la cámara de flujo.
Cortar 5 segmentos y realizar un lavado de desinfección con la solución de alcohol al 70% durante 30 segundosSeleccionar material vegetal que presente tejido dañado y tejido sano.
Tomar resultados y evaluar
Transferir los pedazos desinfectados a la solución de clorox al 3% durante 1-5 minutos con un movimiento constante
Colocar en la cámara de crecimiento
Tomar un trozo de material afectado y dejarlo en solución desinfectante un minuto, se procede con el otro y se deja 2 min, otro 3 min, otro 4y el último 5 min.
Marcar y sellar las cajas petri con vinipel
Transferir asépticamente los segmentos vegetales a la caja petri con medio PDA
Hacer otra muestra con el mismo tejido vegetal, siguiendo el mismo procedimiento y de igual forma se transfieren los segmentos a medio de PDA
Se procede a realizar cuatro enjuagues con agua destilada estéril con movimiento constante durante 2min (cada lavado).
Grafica 1. Proceso llevado a cabo para el aislamiento de Botrytis cinérea.
RESULTADOS
En la primera muestra se puede observar crecimiento alrededor del tejido vegetal, en la quinta división mostrando la presencia de un hongo, en este caso de Botrytis cinérea y las demás divisiones no presentaron resultado alguno exceptuando ciertos contaminantes en baja proporción.Figura 1. Muestra uno aislamiento de Botrytis sp
La segunda muestra presento crecimiento de organismos los cuales se consideran como contaminantes, la única presencia del patógeno se presento en la segunda división.
Figura 2. Muestra dos, replica aislamiento de Botrytis sp con humedad
MARCO TEORICO
A través de la historia se han desarrollado diferentes técnicas para identificar...
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