nannana




Cuantificación de proteína





















1. INTRODUCCIÓN
Las proteínas ocupan un lugar de máxima importancia entre las moléculas constituyentes de los seresvivos o mejor conocidas como bio-moléculas Prácticamente todos los procesos biológicos dependen de la presencia o la actividad de este tipo de moléculas. Existen varios metodos para la cuantificación deproteínas pero la mayoría tiene como principios alguna reacción química de los grupos alquilos o arilo de los diferentes aminoácidos.
El método Biuret es la técnica más simple para la determinaciónde proteínas solubles. Las sustancias que contiene dos o más enlaces péptidos forman un complejo purpura-violeta con sales de cobre(II) alcalinas(Figura1) es posible que el color se desarrolle por laformación de ion coordinado, tetra cúprico con dos grupos aminas adyacente. El desarrollo del color es diferente para cada proteína y su intensidad se puede determinar espectroscópicamente a 540nm. Lacuantificación de la proteína se lleva a cabo con una curva patrón, utilizando el principio establecido por la ley de Beer.
2. HIPÓTESIS
En solución alcalina el Cu+2 reacciona con los enlacespeptídico de las proteínas dando un color purpúreo que se cuantifica espectrofotométricamente (540nm). Como estándar se utiliza una solución de albúmina 1 g%.
Proteína + Cu+2 Complejo --->Cu-Proteína(púrpura)
3. OBJETIVOS
3.1. Objetivo general
- Aplicar un método colorimétrico para determinar la concentración de proteína en una muestra problema.
3.2. Objetivos específicos
-Aprender el manejo delespectrofotómetro y su aplicación en los métodos colorimétricos.
-Determinar la concentración de proteínas en una muestra de albumina, utilizando el método de Biuret.
4. MATERIALES Y MÉTODOSMateriales Pipetas graduadas, 7 tubos de ensayo Gradilla, Agua destilada y Espectrofotómetro
Reactivos Estándar de albumina 1g%, muestra de suero y Reactivo de biuret
Metodología
Se prepara una...