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TÉCNICAS DE MICROSCOPÍA.
Óptica: se trabaja sobre el microscopio.
Fijación: tratamiento químico para matar a las células de modo que quedan como eran in vivo, y que las
moléculas quedenfijadas, que no se eliminen/ laven en manipulaciones posteriores.
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Seccionado: se corta el tejido muy fino, de forma que lo atraviese la luz. Para ello se emplean los
microtomos, estos puedenser:
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De mano: la muestra debe incluirse en un medio, la médula de saúco (de sauce, Salix).
De parafina: incluir la muestra en parafina, una especie de cera. Antes la muestra tiene quepasar un
proceso: deshidratación, se impregna con disolvente X_ilol__/Xileno_) de parafina, este junto a la parafina, y
parafina únicamente.
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De congelación: la muestra se impregna denitrógeno líquido , y luego se corta con cuchilla de acero. Es el
procedimiento más rápido.
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Tinción: si el tejido es casi transparente hay que añadirle colorantes para permitir la visión.Normalmente
se emplean más de un colorante de diferente color y también químicamente distintos. Esta es una sustancia
química que reacciona con unas moléculas determinadas del tejido, quedándosefijado, así se obtiene el
contraste.
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Montaje de la preparación: se montan los diferentes cortes en el portaobjetos. Habitualmente se emplea el
cubreobjetos, entre porta y cubre no debe haberaire. Dependiendo de la duración, la preparación puede
ser:
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Temporales: se emplea agua y otras substancias.
Permanentes: indefinidas, se emplean bálsamo de Canadá y resinas.
Elorden entre montaje de la preparación y tinción, puede variar.
Electrónica: se trabaja sobre fotografías.
Fijación: tiene mucha importancia. Se sigue el mismo proceso que en la microscopíaóptica.
Seccionado: los cortes, muy finos, son atravesados por electrones (muy poco poder de penetración). Se
usan los ultramicrotomos, para poder emplearlos se debe incluir la muestra en una...