Objetivo general


Objetivo general:
a) Revisar y practicar la técnica de Wright y los usos de éste colorante en algunas técnicas en laboratorio.
Objetivo particular:
a) Reconocer cada uno de los pasos de la tinción de Wright para observar células.
Hipótesis:


Introducción (pre laboratorio):
a) Para que sirve la tinción de Wright y ¿que tipo de células tiñe?
b) Quien la descubrió y en que año
c) Cual es ladiferencia de la tinción de gram y la tinción de giemsa
d) Además de que en un frotis sanguíneo teñido con la técnica de Wright se observan células, en donde más se pueden observar células teñidas con la misma técnica?
e) Describe paso a paso la técnica e integra un diagrama

Con el fin de estudiar satisfactoriamente los frotis sanguíneos, es necesario colorearlos.
En la mayoría de loslaboratorios los colorantes más empleados para la tinción hematológica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente con la mezcla de eosina (ácido) y azul de metileno (básico). Además se han incorporado el empleo de derivados por oxidación del azul de metileno que se conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de la coloración púrpura o roja de ciertasestructuras.
Tanto la eosina como el azul de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes estructuras celulares, de forma que las que tienen carácter básico fijan la eosina mientras que las que poseen propiedades ácidas fijan principalmente el azul de metileno.
Esto explica que las estructuras basófilas se tiñan de color azul mientras que los competente acidófilas adquieren uncolor rosado. La diferente afinidad de ciertas granulaciones citoplasmáticas por dichos colorantes permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares en 3 grupos:
 Granulocitos eosinófilos, en los que la granulación específica contiene sustancias de carácter básicos que fijan los colorantes ácidos y se tiñen de color rojo-naranja.
 Granulocitos basófilos, en los que la granulación específicaposee sustancias de carácter ácido que fijan los colorantes básicos y se tiñen de color azul oscuro.
 Granulocitos neutrófilos, en los que la granulación específica posee compuestos de carácter neutro por lo que fijan ambos colorantes simultáneamente, de ahí que se tiñen de color pardo.

Dentro del grupo de colorante tipo Romanowsky los más utilizados son el de Wright, Giemsa y May-Grünwald-Giemsa, entre otras.

Tinción de Wright (modificación de la tecnica Romanowsky por James Homer Wright)
Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en unasolución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares.
Materiales:
 Colorante de Wright
 Solución amortiguadora
 Rejilla horizontal o soporte de tinción.

Técnica:
 Colocar el frotis secado al aire sobre una rejilla o cubeta de tinción con la sangre hacia arriba.
 Cubrir completamente el portaobjetos o cubreobjetos con elcolorante de Wright gota a gota. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, para fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá agregarse una cantidad adicional si éste se comienza a evaporar.
 Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de Wright, para evitar lacoloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Puede usarse de igual manera agua desionizada. Dejar actuar de 10-15 minutos.
 Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un aspecto rosado al examinarlo a simple vista.
 Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol para eliminar cualquier resto de colorante.
 Secar...