Observación de microorganismos en fresco





INDICE

I. INTRODUCCION 1

II. OBJETIVOS 2

III. MATERIAL Y METODOS 2

IV. RESULTADOS 4

V. DISCUSIÓN 5

VI. CONCLUSIONES 5

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 6

VIII. ANEXOS 7






















I. Introducción

En microscopia los preparados son de dos clases: en fresco,cuando la muestra está sumergida en líquido y no existe ninguna sustancia entre la lente frontal y el preparado, excepto el aire; y en seco, cuando entre la lente frontal del objetivo y el preparado existe una sustancia, generalmente aceite de cedro cuyo índice de refracción IR es 1.52 (De Robertis, 1996).

En microbiología el microscopio se utiliza de forma rutinaria, ya que proporcionaimportante información para la identificación temprana y definitiva de los microorganismos (Decré, Barbut, Petit, 2000). En la valoración de las muestras, es trascendente el poder de resolución del microscopio, el cual se define como la capacidad que posee un objetivo para distinguir la distancia mínima entre dos puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos puntos separados. El poder deresolución de un objetivo es el responsable de la calidad, claridad, nitidez y fineza detallada de la imagen, y depende de la longitud de onda (λ) del haz de luz utilizado y de la apertura numérica del objetivo empleado.

Para aprovechar esta ventaja de los microscopios, se han desarrollado técnicas tintoriales que destacan las características morfológicas de los microorganismos (Keller, 2013).Existe una gran variedad de tinciones que pueden ser aplicadas dentro del campo de la microbiología (Madison, 2001)

Un colorante se define como una sustancia capaz de dar color a células, tejidos, fibras, etcétera. De acuerdo con su origen, se pueden dividir en: colorantes naturales, los cuales son extraídos de plantas o animales, y colorantes artificiales, que son aquellos de minerales procesadosy manipulados en el laboratorio.

Las tinciones se pueden clasificar como simples cuando toda la muestra se tiñe del mismo color y se utiliza un sólo colorante (azul de lactofenol o tinta china); tinción diferencial, cuando se visualiza más de un color porque se utiliza más de un colorante (Gram o Ziehl-Neelsen); tinción específica, cuando se utilizan anticuerpos marcados con una moléculafluorescente para identificar una estructura celular en particular –inmunocitoquímico- (Guarner, Brandt; 2011).

Algunas técnicas tintoriales como Gram o ZiehlNeelsen requieren antes de su proceso la fijación de las muestras, con la finalidad de preservar la arquitectura estructural y química de las células (Madison, 2011). Existen dos tipos de fijadores: físicos y químicos. Entre los procesos defijación físicos se tienen los siguientes: desecación, calor seco, calor húmedo, ultrasonido y microondas, mientras que los procesos de fijación químicos se pueden clasificar como oxidantes y reductores, de acuerdo con sus propiedades químicas, siendo en microbiología estas últimas las más efectivas.

II. Objetivos específicos
Observación de microbios Vivos, así como estructuras microbianas.
Realizarcorrectamente preparados en fresco y en seco
Conocer y ejecutar los protocolos de las técnicas de coloración

III. Materiales y Método
Se realizo un estudio de tipo descriptivo, observacional transversal, en el cual se utilizo como material biológico a una infusión de hierba (agua estancada) la cual fue trasladada a el laboratorio de Microbiología general de la escuela académico profesional deMicrobiología de la Universidad Nacional de Trujillo manteniéndose a una temperatura de 23.5 ºC.

La infusión de hierba fue sometida a diversas coloraciones y luego sometida a observación con ayuda de un microscopio para observar los diversos microorganismos que presente.

Material de práctica
2.1.1 Material biológico
Infusión de hierba
Cultivo de Klebsella.
Cultivo de Bacilos
2.1.2 Material de...