Osmolaridad

Osmolaridad Plasmática y permeabilidad de la membrana celular

Introducción

La membrana celular posee diversos mecanismos que permiten mantener la homeostasis en el organismo, permitiendo, por ejemplo, la regulación del pH o de la concentración de iones.

Esta capacidad, se debe principalmente a la permeabilidad de la membrana plasmática, la cual permite el paso selectivo de solutos comotambién permite el paso de moléculas tan esenciales como el agua. El agua, se mueve a través de la membrana plasmática debido a la diferencia de presión osmótica existente entre el medio intra y extra celular, lo cual es determinado por la diferencia de concentración (osm/L) de las partículas que no difunden a través de la membrana. De esta manera, una mayor concentración en el medioextracelular, genera el ingreso de agua, produciéndose hemólisis (rompimiento de la membrana celular) o bien crenacion (salida de agua de la célula).

Todo esto define a la osmolaridad, la cual es una medida de la cantidad de partículas disueltas en una cantidad conocida de solvente. De esta manera, la permeabilidad de la membrana celular permite mantener el equilibrio osmótico celular.

‘Soluciones dedistinta composición y concentración inducen un cambio en la permeabilidad de la membrana, permitiendo mantener el equilibrio interno, lo que se encuentra relacionado con la osmolaridad del plasma ‘

Para lo anterior se estudió la permeabilidad de la membrana al analizar la respuesta de la célula frente a cambios en el medio extracelular (soluciones isotónicas, hipotónicas, hipertónicas),observándose hemólisis en las muestras de sangre en medio hipertónico, y crenacion en medios hipotónicos. Paralelamente se estudio la osmolaridad del plasma, mediante cálculos realizados luego de centrifugar muestras sanguíneas en capilares de hematocrito.

Materiales y Métodos

Se tomo un tubo de 15 mL con sangre, posteriormente se rotularon 6 tubos de ensayo, a los cuales se le agregó 2mL desoluciones de NaCl de diferentes concentraciones de acuerdo a la tabla 1.

Se agito suavemente por inversión la sangre contenida en el tubo, luego con un capilar para microhematocrito se tomo una muestra de sangre y se sello en un extremo con plasticina. Este se rotulo como testigo 1

Posteriormente a los tubos de ensayo que contenían las soluciones de NaCl se le añadió 0,5mL de sangre, secerraron cada uno de los tubos con parafilm y se agitaron suavemente por inversión, luego con capilares para microhematocrito se tomaron muestras de cada uno de los tubos, una vez terminado este procedimiento, se mezclo por inversión nuevamente la sangre contenida en el tubo y se tomo una muestra con un capilar para microhematocrito, este fue denominado testigo 2.

Una vez que se tuvo los 8 capilarespara microhematocrito se llevaron a la centrifuga dispuesta para ello.

Cuando se termino la centrifugación, se tomaron los capilares y se llevaron a un papel milimetrado y se midió la cantidad de glóbulos rojos y el total, para así calcular el porcentaje, tomando en consideración el factor de dilución.

Tabla 1

|Tubo |Concentración |
| |gr/L |mol/L |
|Testigo 1 | ---- | ---- |
|Solución 1 |5,85 |0,1 |
|Solución 2 |7,31 |0,125 |
|Solución 3 |8,77 |0,15 |
|Solución 4 |10,23 |0,175 |
|Solución 5 |11,7 |0,2 |
|Solución 6|14,15 |0,242 |
|Testigo 2 | ---- | ---- |

Paso 2

Se rotularon 13 tubos de ensayos, a cada uno de estos se le agregó cierta cantidad de soluciones que se muestran en la tabla 2, para evitar contaminaciones, para agregar cada solución se ocuparon pipetas diferentes en cada ocasión, se taparon los tubos con parafilm y se agitaron por inversión,...