Pcr Reacción En Cadena De La Polimerasa

PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA)
La PCR es una técnica para la síntesis "in vitro" de secuencias específicas de ADN. Es una forma simple y muy rápida de multiplicar el ADN presente endiferentes muestras biológica, obteniéndose millones de copias de una determinada secuencia de ADN. En poco tiempo esta técnica ha conseguido ser ampliamente utilizada no sólo en el campo de la genéticamolecular, sino en otras muchas ciencias. Las siglas PCR significan "Polimerase Chain Reaction", Reacción en Cadena de la Polimerasa. El inventor de esta interesante técnica fue Kary Mullis por la cualse le adjudicó el Premio Nobel de Química en 1993.
El principio del PCR consiste en determinar la secuencia de interés y seleccionar pequeños segmentos de nucleótidos llamados iniciadores o cebadores,complementarios con la secuencia de nucleótidos de los extremos opuestos de las cadenas que flanquean a dicha secuencia, a partir de los cuales se inicia la elongación o síntesis de nuevas cadenas enel extremo 3' de cada iniciador.
En esta técnica se consideran importantes los siguientes parámetros: un suministro abundante de iniciadores y de desoxinucleótidos trifosfatados (dNTPs); una fuenterenovada de ADN polimerasa (enzima encargada de la síntesis de las cadenas complementarias); y los ciclos periódicos de cambios de temperatura. Estos últimos consisten en: desnaturalización del ADN a100° C, alineamiento de los iniciadores con las secuencias de interés entre 50 y 60° C y síntesis del ADN a 72° C. Estas temperaturas pueden variar de acuerdo con las condiciones de la reacción.
Cuandose comenzó a utilizar la PCR, el empleo de la ADN polimerasa I de E. coli hacía el proceso muy tedioso, pues esta enzima perdía su función al incrementar la temperatura, lo que obligaba a agregar ADNpolimerasa en cada ciclo. Con la introducción de la llamada Taq polimerasa, una ADN polimerasa aislada de la bacteria Thermus aquaticus que vive en aguas termales y tiene una temperatura óptima...