pieles, una forma de maltrato

PROCEDIMIENTO
Reconocimiento y cuantificación de aminoácidos y proteínas por absorbancia a 280nm

Se rotularon cuatro tubos de ensayo como: tubo 1, tubo 2, tubo 3, tubo 4.
Con ayuda de unamicropipeta p1000 se le agregaron diferentes soluciones a los tubos, al primero se le agregó 3,0 mL de NaCl 0,9% p/v, al segundo 3 mL de Glicina, al tercero 3,0 mL de triptófano y al cuarto 3,0 mL de SAB.Posteriormente se leyó el nivel de absorbancia de cada tubo en cubetas de cuarzo con ayuda de un espectrofotómetro.
Luego se determinó la concentración en mg/mL de cada muestra, utilizando loscoeficientes de extinción molar de cada especie a 280nm.


Cuantificación de proteínas por el método de Biuret

Se rotularon 8 tubos de ensayo, como tubo 1, tubo 2, tubo 3, tubo 4, tubo 5, tubo 6,tubo MP1 y tubo MP2.
Nuevamente con una micropipeta se le agregaron diferentes soluciones a los tubos, pero cada uno de ellos debía contener 2,0 mL del reactivo de Biuret.
Al tubo 1 se le agrego2,0 mL NaCl 0,9% p/v.
Al tubo 2 se le agregó 1,8 mL de NaCl 0,9% p/v más 0,2 mL de SAB.
Al tubo 3 se le agregó 1,5 mL de NaCl 0,9% p/v más 0,5 mL de SAB.
Al tubo 4 se le agregó 1,0 mL de NaCl 0,9%p/v más 1,0 mL de SAB.
Al tubo 5 se le agregó 0,5 mL de NaCl 0,9% p/v más 1,5 mL de SAB.
Al tubo 6 se le agregó 2,0 mL de SAB.
Al tubo MP1 se le agregó 2,0 mL de muestra problema al igual que altubo MP2.
Posteriormente se agitaron todos los tubos y se dejaron incubar durante 5 min. a temperatura ambiente.
Luego se leyó el nivel de absorbancia de cada tubo a 540nm. en cubetas de plástico.Se midió la concentración de proteínas contenida en la muestra problema y se comparó con los valores clínicos.

DISCUSIÓN

Durante el práctico nos surgieron diversas interrogantes sobre el porquéalgunas soluciones no reflejaban el mismo color que las otras, solo se podía observar el color del biuret, esto nos sucedió con la muestra del tubo MP1 que contenía orina. Esto se debe a que la...