Polimorfismos De Adn

Electroforesis en campo pulsante (PFGE). Técnica que se emplea para separar moléculas de DNA de tamaño superior a 50 kb, ya que la electroforesis en gel de agarosa al 0,5 1,0% no separa las moléculasmayores de este tamaño.
Se utilizan alteraciones frecuentes de la dirección del campo eléctrico. Existen diferentes formas prácticas para esta técnica, las dos más generales son:
1. Electroforesisde gradiente en gel con campo pulsante (Pulse field gradient gel electrophoresis). Utiliza al menos dos campos eléctricos alternativos que se cruzan en el plano del gel.
2. Electroforesis en gelcon inversión de campo (Field inversion gel electrophoresis). Utiliza un sólo campo eléctrico cuya polaridad se invierte periódicamente.
* Electroforesis en campo pulsante: se usa para distinguirentre cepas de la misma especie. Este método es capaz de resolver fragmentos de ADN con un número de pares de bases muy elevado, de hasta 9000 kb, cromosomas enteros por ejemplo de levaduras. Adiferencia de otras electroforesis esta consta de mas de un campo eléctrico que alternan. El bromuro de etidio es un colorante que además de permitir visualizar las distintas bandas de ADN le da rigidezpara que no se reorienten.
* Sistema CHEF: el campo eléctrico esta generado en este caso por 24 electrodos dispuestos en grupos de 4 en los lados de un hexágono. El gel se disponehorizontalmente. Con este tipo de electroforesis se puede cariotipar una especie, es decir, definir el numero de cromosomas siempre y cuando estos no pasen de 9000 kb.

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** La poliacrilamida es uno de los geles utilizados con más frecuencia para realizar técnicas de electroforesis, las cuales tienen como objetivo realizar un análisis y/o separación por carga y tamañomolecular de los fragmentos de aminoácidos o nucleótidos que componen muestras escogidas de proteínas o ácidos nucleídos como el ADN o el ARN respectivamente.
* La electroforesis de proteínas...