practica 1ª

Practica Nº 1
Aislamiento y cuantificación de DNA genómico
Introducción
La práctica nos pide aislar el DNA que contiene el hígado de rata y hallar la cantidad y pureza que tiene este.Objetivo
Los objetivos de esta práctica son hallar la pureza y la cantidad de ácidos nucleicos que hemos aislado. Para hallar la pureza se debe hallar la absorbancia a 260µm y a 280µm ysustituirlas en la siguiente fórmula:

Para que la concentración sea en su mayoría DNA o RNA, la pureza deberá dar entre 1,8 y 2,0 de tal forma que si el resultado está más cerca de 1,8tendrá más DNA y viceversa. Si el resultado es menor que 1,8 tendrá una contaminación por proteínas, mientras que si el resultado está por encima de 2, será una contaminación pornucleótidos.
También se nos pide hallar el factor de dilución, que se utiliza para saber cuántas veces se ha diluido una solución. La cual se utilizará para hallar la concentración, que serámenor. Su fórmula es la siguiente:

La fórmula de las concentraciones:
Materiales:
Homogeneizador

Vortex

Eppendorf


Espectrofotómetro


Pipeta

Preparación:
Ya que seencuentra completamente explicado en la práctica el protocolo de preparación, me limitaré a citar las fases a las que se debería atener.
1. Lisis celular
2. Purificación
3. Precipitación4. Lavado
5. Cuantificación
Resultados:
Absorbancia a 260µm=0,589
Absorbancia a 280µm=0,587


Volumen final=1000µl
Volumen inicial=10µl


Conclusión:
Como conclusión podemossacar que la pureza que nos ha dado el resultado ha sido contaminada por proteínas
También hemos hallado la concentración con una absorbancia de 260µm.
Bibliografía:
Las fotografías delos materiales han sido sacadas de Google imágenes
Para la búsqueda de información sobre absorbancia y el factor de dilución he utilizado esta página http://quimica.laguia2000.com/