Practica No. 2

Q.F.B. Anaí Arianna Mendoza López
A realizarse: 19 de Septiembre del 2013
Laboratorio Virus y Bacterias
Práctica No. 3
Microscopía: Muestra en fresco y tinción simple

Objetivo
Ejercitar el uso del microscopio y sus partes, utilizando varias muestras que le permitirán conocer al alumno diferentes microrganismos. Observar diferentes morfologías y cómo actúan los MO en su ambiente.
Conocer lastécnicas de preparación, fijación y coloración de tinciones simples más comunes, para familiarizarse con las tinciones complejas como la Tinción de Gram.
Obtener una mejor técnica en el uso del microscopio para el análisis de cualquier microrganismo. Además, aplicar diferentes técnicas que mejoren el resultado visual del MO.

Justificación
El estudio inicial de la Microbiología comienza con laidentificación de los MO, las tinciones como la de Gram son de gran utilidad, pero además de esta, existen otras técnicas de tinción que revelan ciertas características morfológicas, como la presencia de capsula, flagelo y corpúsculos entre otras, por lo que es importante el conocimiento teórico y metodológico de este tipo de tinciones llamadas simples y de contraste.

Marco Teórico
Microscopio
Uno delos pioneros en la construcción de estos aparatos fue Antonio van Leeuwenhoek. Las partes esenciales que componen un microscopio óptico son:

Parte mecánica
Pie o soporte (H): Base al microscopio, en él se encuentra la fuente de iluminación.
Platina (L): Superficie sobre la que se colocan las preparaciones. En el centro se encuentra un orificio que permite el paso de la luz. Hay un sistema depinza para sujetar el portaobjetos (preparación) y unas escalas que ayudan a conocer qué parte de la muestra se está observando. Además, presenta 2 tornillos, que permiten desplazar la preparación en sentido longitudinal y transversal
Tubo: Cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Constituye el soporte de oculares y objetivos.
Revólver porta objetivos (B): Estructura giratoria quecontiene los objetivos.
Brazo o asa (C): Une el tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el microscopio para trasladarlo de manera segura.
Tornillo macrométrico o de enfoque groso (E): Sirve para obtener un primer enfoque. Desplaza la platina verticalmente de forma perceptible.
Tornillo micrométrico o de enfoque fino (F): Sirve para un enfoque. Desplaza verticalmente la platina de formaimperceptible.


Parte óptica
Oculares (A): Sistemas de lentes cercanos al ojo del observador, en la parte superior del microscopio. Cilindros huecos provistos de lentes convergentes cuyo aumento se reseña en la parte superior de los mismos (10X). Mono (1) o binoculares(2).
Objetivos (M): Sistemas de lentes convergentes que se acoplan en la parte inferior del tubo, mediante el revólver. Ordenadosde forma creciente según sus aumentos, en el sentido de las agujas el reloj. Identificados por color. Algunos objetivos se deben de utilizar con aceite de inmersión (normalmente color rojo).
Condensador (J): Sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los concentra sobre la preparación, de manera que proporciona mayor o menos contraste.
Fuente de iluminación (I) : Lámparahalógena de bajo voltaje (12V) situada en el pie del microscopio.
Diafragma o iris (K): Sobre el reflector de la fuente de iluminación. Abriéndolo o cerrándolo permite graduar la intensidad de la luz.
Transformador: Necesario ya que el voltaje de la bombilla es menor que el de la red. Algunos modelos ya lo llevan incorporado en el pie del microscopio.














Tinciones simples
Los especímenesmicrobiológicos teñidos son más fácilmente observables al microscopio, para poder teñirlos es necesario utilizar algunas sustancias colorantes que son compuestos químicos utilizados para aumentar el contrate de las células, algunos se pueden añadir directamente a la muestra en fresco, pero la mayoría son más efectivos si los microorganismos son fijados, es decir adheridos al portaobjetos.
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