Practica Sanguinea

PRÁCTICA : Obtención de un frotis sanguíneo:
Objetivos de la práctica:
-Conocer las propiedades de las diferentes tinciones usadas para realizar el frotis sanguíneo.
-Familiarizarse con el material de laboratorio y aprender su manipulación para luego poder realizar
correctamente los diferentes pasos para un frotis sanguíneo.
-Realizar un frotis sanguíneo con sangre del alumno, etiquetarlo yguardarlo para analizarlo más
adelante.
Materiales:
-Dos portaobjetos.
-Un cubreobjetos.
-Lanceta para punción digital.
-Torundas de algodón.
-Guantes y bata.
-Una cubeta forrada en aluminio para mantener el portaobjetos con el que trabajamos.
-Microscopio de laboratorio.
-Alcohol 70º
-Tinción con colorante Giemsa (formado por una mezcla de eosina, azul metileno y azures en
soluciónacuosa).
-Alcohol metílico absoluto (sin acetona)
-Tampón de PBS
-Agua destilada
Causas de error en la tinción del frotis sanguíneo:
-Coloración excesivamente azul: Frotis muy grueso, lavado insuficiente, Tinción muy prolongada,
colorante demasiado alcalino.
-Coloración muy rosada: El agua del lavado, el colorante o el tampón demasiado ácidos.
-Aparición de artefactos debido a suciedad,deterioro o presencia de grasa en portaobjetos.
-Hidratación de los hematíes: Fijación inadecuada por uso de alcohol metílico no absoluto.Metodología:
1. Preparamos el material que vamos a utilizar y nos colocamos los guantes.
2. Procedemos a desinfectar el dedo del cual extraeremos el frotis sanguíneo (por lo general el dedo
índice o el anular).
3. Pinchamos con lanceta en el pulpejo deldedo, sobre la zona anterior o lateral. Una vez hecho,
apretamos el dedo para bombear sangre hacía afuera. Una vez se haya formado una gota la
acercamos al portaobjetos poco a poco hasta que pase a éste.
4. Limpiaremos el dedo y pondremos una tirita, tiraremos las lancetas y torundas utilizadas al
contenedor de residuos biológicos.
5. Realizamos la extensión del frotis sanguíneo:Tras realizarla extensión, se obtienen tres partes de la muestra:
- Cabeza (con demasiados eritrocitos).
- Cuerpo (zona óptima para la observación, existe un reparto equilibrado de células).
- Cola (eritrocitos en escaso número).
6. Tras dejar secar el frotis durante un par de minutos, aplicaremos el metanol sobre la muestra que
actuará como fijador, lo dejamos reposar durante tres minutos
7. Teñimos lamuestra con el colorante Giemsa (diluido con PBS en proporción 1G:9PBS). Las partes
ácidas de la muestra (como por ejemplo el DNA del núcleo) se teñirán de un color azulado mientras
que las básicas se teñirán de un color rosado.
8. Limpiamos la muestra con agua destilada para sacar el colorante tras haberlo dejado sobre la
muestra unos diez minutos.
9. Aplicamos el cubreobjetos sobre elcuerpo del frotis, ya está listo para la visualización en el microscopio.
Los componentes de la sangre
Los glóbulos rojos, también denominados hematíes óeritrocitos, son las células sanguíneas más numerosas, cuyo característico color rojo se debe a una proteína que se halla en su interior llamada hemoglobina, responsable de ligar el oxígeno para transportarlo desde los pulmones a todos lostejidos del organismo para que las células respiren.
También se encargan de eliminar el dióxido de carbono que se produce por la actividad celular.
Los glóbulos rojos se forman en la médula ósea, que se halla dentro de los huesos del esqueleto, desde donde son liberados al torrente sanguíneo.
Su déficit (anemia) provoca una carencia de oxígeno en los órganos vitales de los enfermos. En este casodeben administrarse concentrados de hematíes.

Los glóbulos blancos, o leucocitos, se encargan de proteger al organismo contra el ataque de bacterias, virus, hongos y parásitos. Cuando hay una infección aumentan su número para mejorar las defensas. Unos se forman en la médula ósea y otros en el sistema linfático (bazo, ganglios, etc...).
Los glóbulos blancos están constantemente atentos a...