preparación de medios de cultivo
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
PRACTICA # 2
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
M.C EDUVIJES CENICEROS VALDÉZ
INTRODUCCIÓN
Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. Estos medios son esenciales en el Laboratorio deMicrobiología por lo que un control en su fabricación, preparación, conservación y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos.
En los laboratorios de microbiología se utilizan diferentes tipos de medios de cultivo que pueden ser preparados en forma líquida o en forma sólida. Usualmente para preparar un medio sólido, se parte de un medio líquido al que sele añade un agente solidificante como el agar, la gelatina o la sílicagel. Los medios de cultivo se pueden clasificar de acuerdo a la naturaleza de sus constituyentes en:
• Medios naturales o complejos: constituidos por sustancias complejas de origen animal o vegetal, las que son usualmente complementadas por la adición de minerales y otras sustancias. En ellos no se conocen todos loscomponentes, ni las cantidades exactas presentes de cada uno de ellos.
Medios definidos o sintéticos: son los medios que tienen una composición química definida cuali y cuantitativamente. Generalmente se usan en trabajos de investigación.
De acuerdo al uso del medio de cultivo, éstos se clasifican en:
• Medios de enriquecimiento: son medios líquidos que favorecen el crecimiento de un tipo demicroorganismo en particular. Permiten aumentar el número de microorganismos de ese tipo. Usualmente contienen una o más sustancias inhibidoras del crecimiento de los microorganismos con excepción de los que se quieren cultivar.
• Medios selectivos: son parecidos a los de enriquecimiento, se diferencian por ser medios sólidos y están diseñados para el aislamiento de microorganismos específicos.
• Mediosdiferenciales: son medios que contienen indicadores de productos derivados de la actividad microbiana de los microorganismos. No contienen ningún tipo de sustancia con actividad antimicrobiana. Permiten revelar características fisiológicas de los microorganismos.
Los medios de cultivo se pueden preparar en el laboratorio a partir de cada uno de sus constituyentes básicos, o por simplerehidratación de productos asequibles comercialmente (medios de cultivo deshidratados). Generalmente se prefiere el uso de los medios de cultivo deshidratados porque, además de simplificar el trabajo, con ellos se tiene mayor probabilidad de obtener resultados reproducibles.
OBJETIVOS
Adquirir experiencia en la preparación, esterilización, vaciado y conservación de diferentes medios de cultivo.Adquirir experiencia en el manejo de la autoclave u olla de presión.
MATERIAL
Agar Nutritivo
Agar McConkey
Caldo nutritivo
Matraz Erlenmeyer
Papel aluminio
Balanza granataria
Espátula
Algodón
Pizeta con agua destilada
Alcohol al 70%
Mechero
Microondas
Cinta
Cajas Petri
Medios de cultivo
Autoclave
Guantes de asbesto
Tubos de ensayo
Pipeta
Propipeta
Marcador permanenteHisopos
Sangre
RESULTADOS
Los resultados obtenidos en la presente práctica fueron los esperados, ya que fue posible adquirir conocimiento, conocer y realizar el procedimiento de la preparación del medio de cultivo.
Checamos los gr/litro en el frasco de medio de cultivo, para determinar la cantidad de cada una de las soluciones que debían integrar el medio nutritivo a formular, sehicieron los cálculos necesarios.
MEDIOS DE CULTIVO
FRASCO
gr/litro
PREPARACIÓN
Agar Nutritivo
50 gr/litro de H2O
50gr 1000ml
X? 100ml
X = 5gr/100ml
Agar MacConkey
23 gr/litro de H2O
23gr 1000ml
X? 100ml
X = 2.3gr/100ml
Caldo Nutritivo
40 gr/litro de H2O
40gr 1000ml
X? 100ml
X = 4gr/100ml
Luego pesamos la cantidad que viene...
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