Preparacion De Medios De Cultivo

Preparación de medios de cultivo

OBJETIVO
* Que el alumno prepare diversos medios de cultivo de acuerdo a los requerimientos de su fórmula

INTRODUCCIÓN
El cultivo es el procedimiento mediante el cual se promueve el crecimiento de los microorganismos, esto se logra proporcionándoles las condiciones ambientales adecuadas, por lo cual es necesario conocer el efecto del medio ambientesobre el crecimiento.
El medio debe contener todos los nutrientes necesarios y debe controlarse cuidadosamente factores tales como el pH, la temperatura y la aireación. Todas las sustancias químicas que un organismo requiere de su medio ambiente para crecer y reproducirse se denominan nutrientes.
Muchos medios de cultivo pueden obtenerse del comercio en forma deshidratada, solo hay que añadirlesagua, distribuirlos y esterilizarlos. Algunos medios de agar frecuentemente utilizados se hallan en el comercio en placas o tubos inclinados en material de vidrio o de plástico desechable.
A continuación se describe la forma de preparar un medio de cultivo en el laboratorio así mismo se indica que tipo de microorganismo se puede desarrollar en él.

PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR:
* CALDOSIMPLE
El caldo simple es un medio de cultivo, no selectivo, utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. La inoculación de la muestra se hace por picadura (directa), se incuba a 35-37º C por 24 h.
Para prepararlo sigue las instrucciones:
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones (medio comercial) |
Pluripeptona |5.0 | Emplear 8 g de polvo por litro de agua destilada. Si es necesario, calentar hasta disolver. Distribuir en tubos de ensayo y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 minutos. |
Extracto de carne | 3.0 | |
pH final: 6.9 ± 0.2 |
En este medio se desarrollan los siguientes microorganismos:
Microorganismos | Crecimiento |
P. mirabilis | Bueno |
E. coli | Bueno |
S.aureus | Bueno |
S. epidermidis | Bueno |
S. typhimurium | Bueno |
P. aeruginosa | Bueno |

NOTA: La turbiedad del medio indica crecimiento de bacterias
* GELOSA (AGAR NUTRITIVO)
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivo. La inoculación de la muestra se hace en placapor estría, se incuba por 24 h, a temperatura entre 35-37º C.
Para prepararlo siga las instrucciones:
Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones (medio comercial) |
Caldo simple | 100 mL | Suspender 31 g de polvo por litro de agua destilada. Mezclar y dejar reposar 5 minutos. Calentar suavemente agitando y hervir 1 o 2 minutos hasta su disolución. Distribuir y esterilizar a 121°Cdurante 15 minutos. |
Agar | 15.0 | |
pH final: 7.3 ± 0.2 |

Los microorganismos que se desarrollan en este medio son:
Microorganismos | Crecimiento |
P. mirabilis | Bueno-excelente |
E. coli | Bueno-excelente |
S. aureus | Bueno-excelente |
B. cereus | Bueno-excelente |
E. faecalis | Bueno-excelente |
P. aeruginosa | Bueno-excelente |
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Aspecto de una placa de petricon agar nutritivo, después de incubar E. coli

* AGAR SANGRE
Es un medio utilizado para propósitos generales, para el aislamiento y cultivo de numerosos microorganismos.
Con la adición de sangre, el medio es útil tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observación dereacciones de hemólisis.
También, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para preparar el medio agar chocolate. El cloruro de sodio que se adiciona a la fórmula mantiene el balance osmótico del medio.
Se siembra por inoculación directa o por estría sobre la superficie del medio de cultivo y se incuba a la temperatura según el microorganismo que se desea aislar.
Para...