“Preparación de medios de cultivo, cuantificación de microorganismos”

CENTRO DE BACHILLERATO, TECNOLOGICO, INDUSTRIAL Y DE SERVICIO NO. 93

“Preparación de medios de cultivo, cuantificación de microorganismos”

Profesor: Julián Reyes Mejía

Alumna: Daniela Gálvez Cortés

4to. “A” Laboratorista Químico
Matutino

No. 26




H. Cárdenas, Tabasco. A 20 de abril de 2012
INTRODUCCION

Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que enconcentraciones adecuadas y en condiciones físicas ópticas, permiten el crecimiento de los microrganismos.
Estos métodos son esenciales en el laboratorio de microbiología por lo que existe un control en su fabricación, preparación, conservación y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos.
En los laboratorios de microbiología se utilizan diferentes tipos demedio de cultivo que pueden ser preparados en forma liquida o en forma solida.
Usualmente para preparar un medio solido se parte de un medio liquido al que se le añade un agente solidificante como el agar, la gelatina o la silicagel. Los medios de cultivo se pueden clasificar de acuerdo a la naturaleza de sus constituyentes en : medios naturales o complejos, constituidos por sustancias complejasde origen animal o vegetal, las que son usualmente complementadas por la adicion de minerales y otras sustancias. Medios definidos o sintéticos, estos tienen una composición química definida cuali y cuantitativamente, generalmente se usan en trabajos de investigación.








DESARROLLO
PARA LA PREPARACION DEL MATERIAL:
Lavar perfectamente los tubos de ensayo y las pipetas. Dejarlassecar.
Después se elaboran tapones de algodón para los tubos de ensayo, los cuales se deben envolver en papel estraza y cubrir las puntas con cinta testigo. Para las pipetas será el mismo procedimiento, pero deberán taponarse de ambos lados.




Esterilizar el material en una olla de presión durante 15 min., después retirar.

PARA LA PREPARACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:
Necesitaremos 10cajas petri de agar MacConkey y 8 cajas petri de agar nutritivo.
Para realizar el agar macconkey en un matraz enlermeyer se disuelven 10 gr de polvo en 200 ml de agua destilada. Calentar hasta que quede preciso.
Colocarle un tapón de gasa y algodón y cubrirlo con papel estraza y cinta testigo.
Para el agar nutritivo disolver 3.68 gr de polvo en 160 ml de agua destilada, todo en un matrazenlermeyer. Envolver igual que con el agar MacConkey.
Esterilizar en olla de presión durante 15 min.


MATERIAL
18 cajas petri desechables

4 tubos de ensayo

4 pipetas graduadas de 1º ml

2 matraces erlenmeyer de 250 ml

Mechero

Mangueras

Papel estraza

Cinta testigo

Asa bacteriológica

Agar MacConkey

Agar Nutritivo





MEDIOLÍQUIDO
Para este cultivo utilizamos agua de melón que compramos en la cafetería de la escuela,
Procedimos a marcar los tubos de ensayo, el primero con la “muestra”, el segundo se marcó como dilución “1:10”, el tercero “1:100” y el cuarto “1:1000”
De igual manera se marcaron las pipetas graduadas
Después de marcado el material, se hicieron las diluciones. Al tubo marcado con “muestra” agregarlecierta cantidad del agua de melón, a los tubos marcados con “1:10”, “1:100” y “1:1000” agregarle 9 ml de agua peptonada cuidando que nada se contamine, utilizar el calor de la flama del mechero.
El tubo con agua peptonada marcado con “1:10”, agregarle 1 ml de la “muestra”
Al tubo marcado con “1:100” agregarle 1 ml de la dilución “1:10”
De igual manera, al tubo marcado con “1:1000” agregarle 1 mlde la dilución “1:100”.
Marcar dos cajas de agar nutritivo con “1:10” y “1:100” respectivamente, marcar una placa de agar MacConkey con “1:1000”
Se procede a estriar las cajas, se introduce el asa bacteriológica a la dilución “1:10” y se estría la placa marcada de igual manera con “1:10”, cuidando que la gota cubra toda el área, se hace el mismo procedimiento con las demás cajas.
Sellar e...