Proceso Para Obtener Una Pataente Biotecnológica
Páginas: 9 (2238 palabras)
Publicado: 12 de marzo de 2013
PROCEDIMIENTO PARA EL AISLAMIENTO SELECTIVO DE ACTINOMYCETES DE SEDIMENTOS ACUÁTICOS
DESCRIPCIÓN
La presente invención se refiere a un procedimiento para el aislamiento selectivo de Actinomycetes de sedimentos acuáticos.
Más específicamente, la presente invención se refiere al procedimiento para el aislamiento selectivo de Actinomycetes de sedimentos acuáticos que segreguen metabolitossecundarios, como antibióticos.
CAMPO DE LA INVENCIÓN
Los Actinomycetes son bacterias Gram-positivas con un alto contenido de G+C. Dado que son fuentes naturales de compuestos bioactivos, principalmente antibióticos, las investigaciones se centran en la búsqueda de métodos selectivos para el aislamiento de los mismos, incrementando las posibilidades de aislar nuevas especies de Actinomycetesútiles en biotecnología.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Cuando se toma una muestra de suelo, con seguridad se puede encontrar en ésta una gran cantidad de microorganismos para los cuales se debe contar con medios selectivos que permitan aislar únicamente el organismo deseado. Es por esto que se debe encontrar un medio y condiciones necesarias de incubación que tendrán como requisito serinhibidoras para los organismos indeseables o de favorecer el crecimiento de los organismos objeto de estudio; como lo sugiere el método de enriquecimiento, previo al uso de una fuente adecuada de inóculo. El dicho “todo está en todas partes y el ambiente lo selecciona”, tiene cierta base (Madigan, 1998).
El tiempo de incubación para cajas de aislamiento es usualmente de 7 a 14 días, cuando lamayoría de Actinomycetes ya habrán producido colonias visibles a simple vista.
Sin embargo, el crecimiento temprano de algunas especies de bacterias puede modificar el ambiente nutritivo del plato de aislamiento por suprimir factores de crecimiento, tal como sideróforos, o reduciendo la concentración de componentes tóxicos. Variedades tardías aparecen eventualmente, lo cual muestracaracterísticas de crecimiento normal cuando son aislados (Nolan, 1989).
Otra opción complementaria en el proceso de aislamiento es el método de dispersión y centrifugación diferencial (DCD) que ha mostrado ser de 3 a 12 veces más eficaz extrayendo propágulos de Actinomycetes de un rango de suelos que el proceso estándar de agitación del suelo en el diluyente. Con esto lo que se pretende es desintegraral máximo las aglomeraciones de partículas del suelo para contar con una mayor área superficial para la extracción de Actinomycetes (Bull et al., 2000).
Los procedimientos usados para promover la disociación de microorganismos de forma particular incluyen el uso de sustancias buffer, agentes quelatantes, decantación y otros; la repetida homogeneización del suelo en varios buffers seguidos porla separación del extracto del residuo; son procedimientos perfilados para diferenciar los problemas sobre los grados variantes.
Algunos de estos procedimientos físico-químicos fueron incorporados en una dispersión multifase y procedimientos de centrifugación diferencial mostraron ser eficaces para muestreo de bacterias, incluyendo Actinomycetes de suelos con texturas diferentes (Bull etal., 2000).
La técnica, designada método de rehidratación y centrifugación (RC), consiste en sumergir el material secado al aire en 10 ml de fosfato buffer conteniendo el 10% del extracto del suelo, permitiendo que la preparación permanezca a 30 ºC por 90 minutos, seguido por centrifugación del fluido a 1,500g por 20 min. Las porciones del sobrenadante que contienen zoosporas de Actinomycetesson inoculadas sobre agar ácido húmico el cual es complementado con ácido nalixídico y trimetoprin como inhibidores selectivos para bacterias Gram negativas (Hayakawa et al., 2000).
Los medios de cultivo comúnmente utilizados para el aislamiento de Actinomycetes son agar almidón caseína y agar glucosa-extracto de malta, los cuales favorecen el crecimiento de los Actinomycetes por su...
DESCRIPCIÓN
La presente invención se refiere a un procedimiento para el aislamiento selectivo de Actinomycetes de sedimentos acuáticos.
Más específicamente, la presente invención se refiere al procedimiento para el aislamiento selectivo de Actinomycetes de sedimentos acuáticos que segreguen metabolitossecundarios, como antibióticos.
CAMPO DE LA INVENCIÓN
Los Actinomycetes son bacterias Gram-positivas con un alto contenido de G+C. Dado que son fuentes naturales de compuestos bioactivos, principalmente antibióticos, las investigaciones se centran en la búsqueda de métodos selectivos para el aislamiento de los mismos, incrementando las posibilidades de aislar nuevas especies de Actinomycetesútiles en biotecnología.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Cuando se toma una muestra de suelo, con seguridad se puede encontrar en ésta una gran cantidad de microorganismos para los cuales se debe contar con medios selectivos que permitan aislar únicamente el organismo deseado. Es por esto que se debe encontrar un medio y condiciones necesarias de incubación que tendrán como requisito serinhibidoras para los organismos indeseables o de favorecer el crecimiento de los organismos objeto de estudio; como lo sugiere el método de enriquecimiento, previo al uso de una fuente adecuada de inóculo. El dicho “todo está en todas partes y el ambiente lo selecciona”, tiene cierta base (Madigan, 1998).
El tiempo de incubación para cajas de aislamiento es usualmente de 7 a 14 días, cuando lamayoría de Actinomycetes ya habrán producido colonias visibles a simple vista.
Sin embargo, el crecimiento temprano de algunas especies de bacterias puede modificar el ambiente nutritivo del plato de aislamiento por suprimir factores de crecimiento, tal como sideróforos, o reduciendo la concentración de componentes tóxicos. Variedades tardías aparecen eventualmente, lo cual muestracaracterísticas de crecimiento normal cuando son aislados (Nolan, 1989).
Otra opción complementaria en el proceso de aislamiento es el método de dispersión y centrifugación diferencial (DCD) que ha mostrado ser de 3 a 12 veces más eficaz extrayendo propágulos de Actinomycetes de un rango de suelos que el proceso estándar de agitación del suelo en el diluyente. Con esto lo que se pretende es desintegraral máximo las aglomeraciones de partículas del suelo para contar con una mayor área superficial para la extracción de Actinomycetes (Bull et al., 2000).
Los procedimientos usados para promover la disociación de microorganismos de forma particular incluyen el uso de sustancias buffer, agentes quelatantes, decantación y otros; la repetida homogeneización del suelo en varios buffers seguidos porla separación del extracto del residuo; son procedimientos perfilados para diferenciar los problemas sobre los grados variantes.
Algunos de estos procedimientos físico-químicos fueron incorporados en una dispersión multifase y procedimientos de centrifugación diferencial mostraron ser eficaces para muestreo de bacterias, incluyendo Actinomycetes de suelos con texturas diferentes (Bull etal., 2000).
La técnica, designada método de rehidratación y centrifugación (RC), consiste en sumergir el material secado al aire en 10 ml de fosfato buffer conteniendo el 10% del extracto del suelo, permitiendo que la preparación permanezca a 30 ºC por 90 minutos, seguido por centrifugación del fluido a 1,500g por 20 min. Las porciones del sobrenadante que contienen zoosporas de Actinomycetesson inoculadas sobre agar ácido húmico el cual es complementado con ácido nalixídico y trimetoprin como inhibidores selectivos para bacterias Gram negativas (Hayakawa et al., 2000).
Los medios de cultivo comúnmente utilizados para el aislamiento de Actinomycetes son agar almidón caseína y agar glucosa-extracto de malta, los cuales favorecen el crecimiento de los Actinomycetes por su...
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