Prote Nas



Determinación de proteínas en un alimento
Método Kjeldahl

Bioquímica

Jesús Eduardo Flores Bustos
Lorena Muñoz Espinoza




6-BT/M




Introducción

El contenido total de proteínas en los alimentos está conformado por una mezcla compleja de proteínas. Estas existen en una combinación concarbohidratos o lípidos, que puede ser física o química. Actualmente todos los métodos para determinar el contenido proteico total de los alimentos son de naturaleza empírica.

En 1883 el investigadordanés Johann Kjeldahl desarrolló el método más usado en la actualidad para el análisis de proteínas (método Kjeldahl) mediante la determinación del nitrógeno orgánico. En esta técnica se digieren lasproteínas y otros componentes orgánicos de los alimentos en una mezcla con ácido sulfúrico en presencia de catalizadores.  El nitrógeno orgánico total se convierte mediante esta digestión en sulfatode amonio.  La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El destilado se recoge en una solución de ácido bórico.  Los aniones del borato así formado se titulan con HCl (oH2SO4) estandarizado para determinar  el nitrógeno contenido en la muestra.
El resultado del análisis es una buena aproximación del contenido de proteína cruda del alimento ya que el nitrógeno tambiénproviene de componentes no proteicos.

REACCIONES LLEVADAS A CABO EN EL MÉTODO DE KJELDAHL
DIGESTIÓN
catalizadores→
(1) n - C -NH2 + mH2SO4 CO2 + (NH4)2 SO4 + SO2proteína                                calor→
NEUTRALIZACIÓN Y DESTILACIÓN
(2) (NH2)SO4 + 2 NaOH          →          2NH3 + Na2SO4+ 2H2O
(3) NH3 + H3BO3 (ácido bórico)         →          NH4 + H2BO3- (ión borato)
TITULACIÓN
El anión borato (proporcional a lacantidad de nitrógeno) es titulado con HCl (o H2SO4)estandarizado:
(4) H2BO3- + H+             → H3BO3


Materiales
1 bureta electrónica “Digitrate-Pro 50”  resolución 0.01...