Prueba De Kastle Meyer

LA PRUEBA DE KASTLE MEYER.
I. Historia y Notas.
Se atribuye a Louis-Jacques Thenard (1777-1857) y Christian Freidrich Schonbein(1799-1868) los primeros pasos científicos hacia un ensayo confiable que permitieradetectar la presencia de sangre
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. Thenard descubrió el peróxido de hidrógeno en 1818, ySchonbein describió la primeraprueba de orientación en 1863. Esta prueba se basaba enel hecho de quela peroxidasa
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, al contacto con la hemoglobina, generaba la oxidacióndel peróxido de hidrógeno. La mezcla del peróxido de hidrógeno y la hemoglobinaresultaba en un burbujeo o reacción de efervescencia debido al desprendimiento deburbujas de oxígeno. Empíricamente, es posible apreciar dicha reacción cuando selimpia una herida sanguinolenta con peróxido de hidrógeno. Shonbein describió que silasustancia desconocida tratada con peroxido de hidrógeno despedía burbujas, eraprobable que contuviese hemoglobina, ergo era factible que se tratase de sangre. Aprincipios del siglo XX, el Dr. Joseph H. Kastle (1864-1916) desarrolló una pruebacualitativa para hemoglobina mediante el uso de la fenolftaleína como indicador decolor. Un poco después, el Dr. Julius Lothar Meyer (1830-1895) mejoró dichapruebadespués de muchos estudios, es por eso que dicha pericia tomó el nombre de prueba deKastle-Meyer. Hoy en día, se la conoce también como prueba del guayacol.
II. Ventajas y Limitaciones.
Para hablar de las ventajas y limitaciones de la prueba de fenolftaleína, es importantetener en cuenta dos nociones cruciales para la química forense:
sensibilidad
y
especificidad
. La
Sensibilidad
serefiere al factor de dilución de una sustancia (en estecaso sangre) que puede ser detectada por el reactivo. La sensibilidad de la prueba deKastle Meyer es de aproximadamente una parte en diez mil; 1:10.000. Esto significaque si se agrega a una gota de sangre diez mil gotas de agua todavía podría ser detectadapor el peritaje. La
especificidad,
en cambio, se refiere a cuantas sustancias, distintas alasangre podrían arrojar también un resultado positivo al someterse a la prueba. Estadescrito que sólo la hemoglobina genera un resultado positivo al aplicar esta pericia.Empero, la literatura sugiere que los falsos positivos podrían ocurrir en presencia deelementos químicos oxidantes y que las peroxidasas de origen vegetal reaccionentambién en forma idéntica; conviene destacar que estos falsospositivos suceden sóloDESPUES de aplicar la fenolftaleína y ANTES de agregar el peróxido de hidrógeno.Una prueba POSITIVA es perceptible por el desarrollo de un color rojo oscuro a lospocos segundos de aplicarse el peróxido de hidrógeno. Puede decirse entonces que laprueba de Kastle Meyer es altamente específica para la sangre.
En general, los reactivos vienen en botellas color ámbar, estas tienen laventaja deproteger los químicos de la luz solar, la cual podría acortar su vida útil.
III. Químicos Necesarios para el Peritaje.
En general, los químicos contenidos en un kit para la prueba de Kastle Meyer son:
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Muestra de Control:
se trata de un pequeño trozo de papel de filtro o telaimpregnada con sangre seca de origen animal. Se usa sangre animal para evitarla posibilidad de transmisión deenfermedades. El kit contiene pues, una muestraque sabemos es sangre con 100% de seguridad. Esto nos permitirá probar losreactivos en la propia escena del suceso o en el laboratorio antes de aplicar lapericia a las sustancias sospechosas que encontremos. Este debe ser un primerpaso obligado ya los químicos podrían estar vencidos o contaminados. Lafenolftaleína, por ejemplo, es un reactivo muysensible y puede oxidarse confacilidad si dejamos la tapa de los frascos mal cerradas. También, es posible quelos reactivos se contaminen luego de varias pruebas si dejamos que las puntas delos goteros toquen las muestras, hisopos, superficies, papel de filtro, etc.debemos preferir el agua destilada en viales o frasco con gotero, esto permiteque este libre de contaminación hasta la última gota.
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