pruebas bioquimicas

IDENTIFICACION TAXONOMICA DE TRES BACILOS GRAM NEGATIVOS POR PRUEBAS BIOQUIMICAS
Facultad de Ciencias Básicas, Programa de Biología, Universidad del Magdalena, Santa Marta – Magdalena. Colombia
Resumen
La identificación taxonómica de los tres de bacilos Gram negativos se realizo por medio de pruebas bioquímicas: Oxidasa, Catalasa, Citrato, Indol, Fermentación de azucares, Ureasa, Rojo demetilo, Vogues Prokaure. Con el fin de determinar el género y la especie de estos microorganismos. A partir de los resultados obtenidos en las pruebas bioquímicas de cada uno de los bacilos se logro identificar a Pseudomona aeruginosa, Echerichia coli. Caracterizándose a la primera como aerobia estricta sin fermentación de azucares y a la segunda como anaerobia facultativa con la capacidad defermentar glucosa.
Palabras claves: Pruebas bioquímicas, Escherichia coli, Pseudomona aeruginosa.

INTRODUCCION

MATERIALES Y MÉTODOS
Identificación por pruebas bioquímicas: Las pruebas bioquímicas son sencillas y eficaces para la identificación bacteriana. La detección y la producción de catalasa por medio de H₂O₂, la actividad de citocromo oxidasa y la presencia de indol con el reactivo deKovacs son técnicas fáciles de emplear en el laboratorio (Miguel Gobernado y J.L Lopez, 2003).
Prueba de catalasa: se evalúa la liberación de O₂, que ocurre cuando esta enzima cataliza la ruptura de la molécula de agua oxigenada. Esta prueba permite diferenciar estafilococos (reacción + con burbujeo) de estreptococos (presenta reacción -). Permitiendo la identificación de cocos gram positivostales como: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus mutans, y cocos gram negativos como: Neisseria y Moraxella (Catalasa +).
Prueba de la oxidasa: se mide la actividad del citocromo C mediante la oxidación de un reactivo indicador amino-dimetilamina (Valencia, 2007). Se logra realizar la identificación de bacilos Gramnegativos de los géneros: Escherichia, Proteus, Enterobacter (oxidasa -) y de las familias: Pseudomonaceae y Vibrionaceae (oxidasa +), y bacterias con morfología de cocos Gram negativos como: Neisseria y Moraxella (oxidasa +).
Prueba de citrato: se determina si la bacteria usa como única fuente de carbono el citrato para su metabolismo y crecimiento, provocando la alcalinización del medio. Para estaprueba se utiliza como medio de cultivo el Citrato de Simmons, el cual contiene citrato de sodio como fuente de carbono y fosfato de amonio como fuente de nitrógeno y azul de bromotimol como indicador de pH. Con esta prueba se identifica: Enterobacter, Salmonella, Klebsiella (positivos), Echerichia coli y Shigella (Negativos).
Prueba de Indol: permite determinar la presencia de triptofanasa, lamovilidad del microorganismo y la capacidad de liberar acido sulfhídrico por acción enzimática de los aminoácidos que contienen azufre, lo cual se produce una coloración negra. La producción de indol ocurre solamente en las bacterias capaces de fermentar hidratos de carbono.
Fermentación de azucares: En esta prueba se determina si el bacilo Gram negativo utiliza la glucosa, lactosa o sacarosade manera fermentativa y en forma H₂S. (Betty A. Forbes, 2003). Esta prueba permite la identificación de Enterobacterias debido a que este grupo bacteriano metabolizan el azúcar que contiene el medio de TSI, por acción de las enzimas que constituyen la bacteria usan la glucosa para la obtención de energía.
Fermentación acido mixta: permite la determinación cualitativa en la producción de ácidosusando un indicador de pH, los resultados positivos ayudan a diferenciar a Escherichia coli y a especeies de Yersinia.
Voges Proskaver: es positiva para Klebsiella pneunoniae y Yersinia enterolitica, el uso de esta prueba bioquímica permite establecer la fermentación de butilenglicol como vía alternativa en el metabolismo del acido piruvico. Al medio se le adiciona alfa-naftol que actúa como...