Pruebas Bioquimicas

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| Batería de Pruebas Bioquímicas | |
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Aquí están algunas de las Pruebas Bioquímicas más frecuentes: · Fermentación de la lactosa (Mc Conkey) · Agar Hierro de Kliger (KIA) · Prueba del Indol · Citrato de Simmons · Agar Hierro Lisina (LIA) · Agar Urea de Christiansens · Prueba de la Fenilalanina (PPA) · Reducción de los Nitratos · Movilidad · RM - VP ·Oxidasa y Catalasa |
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| Fermentación de la lactosa (Mc Conkey) | |
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El agar Mc Conkey es un medio sólido, diferencial y selectivo. Se usa para la discriminación de bacterias con capacidad de fermentar la lactosa (Lac + y -).Composición g/l : - Peptona 20.0 : fuente de nitrógeno y carbono para las Lac -.- Lactosa 10.0 : fuente de carbono para lasLac +.- Sales biliares 2.5 : le confiere carácter selectivo, inhibiendo el crecimiento de Gram +.- Cloruro sódico 5.0 : para mantener la tonicidad del medio (evitar osmosis).- Rojo neutro 0.05 : indicador que va hacer que el medio vire de coloración. Si las bacterias son Lac +, producirán ácidos derivados de la fermentación que darán al medio un aspecto rosáceo; si por el contrario son Lac -, elmedio se basificará por el uso de la peptona y se tornará amarillo.- Cristal violeta 0.001 : interfiere junto con las sales biliares en la selectividad del medio.- Agar-agar 15.0: da consistencia al medio. |
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| Lac +        | Lac - | |
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| Agar Hierro de Kliger (KIA) | |
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El agar Hierro de Kliger (KIA), esun medio sólido y diferencial. El fundamento se basa en la capacidad de fermentación de dos azucares (glucosa y lactosa), en la producción de ác. sulfhídrico y en la producción de gas. Composicion g/l: Extracto de carne 3.0 | Extracto de levadura 3.0 |
Peptona 20.0 | Lactosa 10.0 |
Glucosa 1.0 | Cloruro sódico 5.0 |
Citrato férrico amónico 0.5 | Tiosulfato sódico 0.5 : fuente de azufre, lasbacterias lo reducen produciendo ác. sulfhídrico (precipitado negro) |
Rojo de fenol 0.03 : indicador, si vira a rosáceo , indica basicidad del medio, si es amarillo indica acidificación (derivada de ác. de la fermentación) |
Interpretación del Kliger: NC o SC: no cambio o sin cambio | LC, Alk o K : alcalinidad |
H2S o subíndice s: si produce ác. sulfhídrico | G: productora de gas |Ejemplo: A/As indica que es fermentador de glucosa, lactosa y productor de sulfhídrico |
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| 1 | Fermentador glucosa, productor ác. sulfhídrico y de gas. |
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3 | Fermentador glucosa, lactosa y productor de gas. |
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| Prueba del Indol | |
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Pone de manifiesto la presencia de la encima Triptofanasa ennuestras bacterias, si esta presente degradará el triptofano y liberará al medio Indol, para revelar su presencia usaremos el reactivo de Kovac; si hay indol se formará un anillo rojo en la superficie, sino este será amarillo. Para esto sembramos en caldo con triptofano. |
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| Indol+ | Indol- |
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| Citrato de Simmons | ||
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Cit + | Cit - |
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| |   | Se usa para determinar si el organismo es capaz de utilizar el citrato como única fuente de carbono y compuesto amoniacales como única fuente de nitrógeno. El medio contiene citrato sódico, fosfato de amonio y azul de bromotimol como indicador; este se tornará azul cuando el medio se basifica. Las bacterias quemetabolizan el citrato liberan iones amonio al medio (degradación del fosfato amónico) lo que provoca que este se alcalinice y el indicador vire azul. | |
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| Agar Hierro Lisina (LIA) | |
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Este medio pone de manifiesto: - Si la bacteria posee la enzima descarboxilasa (LDC). el medio contiene como indicador Purpura de Bromocresol, cuando la lisina...