pruebas de identificacion bacteriana

COCOS GRAM POSITIVOS: Aspectos prácticos
Verónica Seija
TAXONOMIA - Breve reseña
Antes de entrar de lleno en la identificación del género
Staphylococcus realizaremos una breve introducción a
la taxonomía de los cocos Gram positivos.
Estos se pueden clasificar, en primera instancia, en
cuanto a sus requerimientos atmosféricos. Así tenemos
los cocos Gram positivos anaerobios estrictosconstituidos por los géneros Peptococcus y
Peptoestreptococcus, los cuales serán estudiados en el
capítulo referido a bacterias anaerobias.
Por otro lado tenemos los cocos Gram positivos aerobios
y anaerobios facultativos que están constituidos por la
familia Micrococacceae (géneros Staphylococcus,
Micrococcus, Planococcus y Stomacoccus) y los
géneros Streptococcus y Enterococcus.
GENEROSTAPHYLOCOCCUS
IDENTIFICACION
Durante el curso se le entregarán a los estudiantes
distintas cepas de cocos Gram + para su identificación.
El primer paso para la identificación de una especie
bacteriana es el estudio de su morfología microscópica y
macroscópica. Luego se deben estudiar sus
requerimientos atmosféricos y nutricionales. Por último
se procede a la realización de pruebas bioquímicasque
permitirán llegar a la identificación de género y especie
bacteriana.
Morfología microscópica
Para la misma se debe realizar un frotis, de preferencia a
partir de medio líquido, realizando luego la tinción de
Gram lo que nos permitirá apreciar la forma, agrupación
y comportamiento al Gram de la cepa en estudio. El
género Staphylococcus se caracteriza por ser cocos
Gram positivos quese agrupan en forma de racimo.
Morfología macroscópica
Existe morfología macroscópica en medio líquido y en
medio sólido. En medio líquido debemos observar la
turbidez que se desarrolla luego de incubar 18-24 horas.
En medio sólido debemos contar con un aislamiento de
la cepa a estudiar en una placa de Petri. El aislamiento
nos permitirá observar las características de las colonias,
que sonlas estructuras macroscópicas que forman las
bacterias cuando crecen en medios sólidos.
Requerimientos atmosféricos
El género Staphylococcus es aerobio-anaerobio
facultativo, por tanto su crecimiento en tioglicolato será
en toda la extensión del tubo.

El género Staphylococcus es no exigente en cuanto a sus
requerimientos nutricionales, por lo tanto crece en
medios de cultivo pobres.ENSAYOS BIOQUIMICOS
Las pruebas o ensayos bioquímicos son aquellas que
ponen en evidencia la existencia de una enzima o pasos
metabólicos determinados.
Ahora enumeraremos las pruebas bioquímicas necesarias
para la identificación de los estafilococos.
1. PRUEBA DE LA CATALASA
Objetivo: Separar la Flia. Micrococacceae (catalasa +)
de los Géneros Streptococcus y Enterococcus (catalasa
-).Fundamento: La enzima catalasa descompone el
peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno bajo la
fórmula 2 H2O2----2 H2O + O2. De esta manera las
bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, que es
un producto final del metabolismo aerobio de los
azúcares.
Procedimiento: Se coloca una gota de H2O2 al 3% sobre
un portaobjetos y luego se transfiere una porción de
colonia sobre el H2O2realizándose una emulsión. En lo
posible debe tomarse la colonia a partir de un medio sin
sangre ya que los eritrocitos tienen actividad de catalasa
y pueden falsear los resultados.
Esta prueba también puede realizarse en un aislamiento
en tubo, simplemente colocando unas gotas de H2O2
dentro del mismo.
Interpretación de resultados: El desprendimiento de
burbujas se considera una pruebapositiva.
Dentro de la Flia. Micrococacceae existen 4 géneros, el
de mayor importancia clínica es el Género
Staphylococcus. Para diferenciarlo del Género
Micrococcus se realizan distintas pruebas bioquímicas
que sólo mencionaremos en la Tabla Nº 2.
Dentro del G.Staphylococcus existen 3 especies de
importancia clínica: S.aureus, S.saprophyticus y
S.epidermidis. Estas se diferencias según las...