Pruebas Nioquimicas

Prueba de motilidad.
La motilidad se puede observar por un crecimiento turbio lejos de la picadura realizada en la inoculación de los medios OF o en un medio SIM, este método es de confianza variable ya que la picadura se pudo haber hecho chueca o irregular lo que nos  darian falso positivo. Para evitar este factor se realiza la técnica de gota suspendida bacteriana.
Llamada también de la gotasuspendida. Algunas bacterias son móviles por presentar flagelo, los flagelos son encontrados principalmente en las formas bacilares y pueden presentarse en número y posición variados(monotricos, peritricos, etc.). La base de esta prueba es determinar si la bacteria es móvil o inmóvil. Con un asa de inoculación se le coloca a un cubreobjetos un poco de muestra y se le agrega una gota de aguadestilada. Se coloca sobre un portaobjetos y se observa al microscopio. Podremos observar si las bacterias tienen movimientos rectilíneos o curvos y en todas direcciones. Ejemplos:
Motilidad (+): como en Pseudomonas auruginosa
Motilidad (-): como en Pasteurella multocida.

Técnica de gota suspendida: Agregar sobre un portaobjetos una gota de solución fisiológica salina estéril, ponerle un poco demuestra bacteriana, homogeneizar de tal forma que la gota no se extienda mucho, ponerle encima un cubreobjetos al que previamente se le a puesto una base de 4 bolitas pequeñas de plastilina con el objetivo de evitar que aplaste totalmente la gota con bacteria, finalmente observar al microscopio con un objetivo de 40X. Se alcanzan haber bacterias muy pequeñas y casi translúcidas moverse a velocidadvariable, observar al menos de 5-10 bacterias recorrer todo el campo de visión para declarase una motilidad positiva. La mayoría de las bacterias motiles son de morfología bacilar o sea Bacilos., Pero no todos los bacilos son motiles.

Prueba de ácido sulfhídrico.
Medio y cultivo: Medio SIMComposición:
a) Extracto de carne
b) Peptona
c) Hierro peptonizado (indicador de SH2)
d) Tiosulfato de sodio(indicador de SH2)
e) Agar
f) Agua destilada
g) pH = 7.3
•Fundamento
Determinar si un organismo es móvil o inmóvil, si es capaz deliberar ácido sulfhídrico por Medio y cultivo: Medio SIMComposición:
a) Extracto de carne
b) Peptona
c) Hierro peptonizado (indicador de SH2)
d) Tiosulfato de sodio (indicador de SH2)
e) Agar
f) Agua destilada
g) pH = 7.3
•Fundamento
Determinar si un organismo es móvil oinmóvil, si es capaz deliberar ácido sulfhídrico por acción enzimática de los aminoácidos que contienen azufre produciendo una reacción visible de color negro y por último la capacidad de desdoblar el indol de la molécula triptófano, además que la consistencia del medio permite la observación de la movilidad de algunas bacterias.
• Prueba
La proteólisis de las proteínas en aminoácidos(aa.)Individuales, algunas especies bacterianas son capaces deliberar azufre enzimáticamente de los diferentes aa. quelas contienen, produciendo el gas ácido sulfhídrico (SH2). La peptona, cisteína y tiosulfato, todos son fuentes de azufre, pero las diferentes especies utilizan distintos compuestos oaa. Que contienen azufre para producir SH2. La enzima responsable de ésta actividad es la cisteínasa.
Primeraetapa:
La bacteria reacciona con el tiosulfato de sodio por medio de una reacción de reducción que da un sulfito y un sulfato. Éste es un proceso de respiración anaeróbica donde el átomo de azufre sirve como aceptor de electrones para la oxidación de los sustratos orgánicos. El tiosulfato reemplaza al sulfato como aceptor de electrones y es una fuente de azufre para el organismo.
Segunda etapa:
Elgas incoloro SH2 reacciona con una sal pesada, citrato férrico de amonio para producir un precipitado negro insoluble, sulfuro ferroso.
Bacteria (medio ácido) + tiosulfato de sodio ->gas SH2
SH2+ iones férricos sulfuro ferroso (pp. negro)
Medios para la detección de H2S
Agar sulfito de bismuto
Agar citrato sulfuro
Medio TSI
Agar acetato de plomo
Agar desoxicolato - citrato
Medio LIA
Agar S-S...