Qué Es Un Topisomero

1- ¿Qué es un topisomero?
Moléculas bicatenarias de DNAabrir glosario comprenden la formación de superhélices, o superenrollamientos de la doble héliceabrir glosario sobre sí misma, y la existenciade varios estados de superenrollamiento (topoisómeros) distintos y no interconvertibles.
2- ¿Cuáles son los sitios de restricción de las enzimas EcoRI y HindIII?

EcoR1






HindIII3- ¿Cuál es la definición de na unidad internacional (UI) y para qué sirve?
Es una unidad de medida de la cantidad de una sustancia, basada en su actividad biológica mediada (o sus efectos). Esusada para vitaminas, hormonas, algunas drogas, vacunas, productos sanguíneos y sustancias biológicamente activas similares.
4- ¿Qué factores deben cuidarse en una restricción?
a) Pureza del DNA – lareacción de enzimas es muy dependiente de la pureza, contaminantes como proteínas, fenol, cloroformo, etanol, EDTA, SDS, altas concentraciones de sal, etc. inhiben la endonucleasa.
b) Temperatura y pH– las enzimas son muy sensitivas a temperatura y pH en lo que respecta a su estabilidad y actividad.
c) DNAsas – Las DNAsas degradan el DNA en presencia de Mg++ .
d) Contaminantes con carga (-).
e)DNA contaminado con otro DNA.
f) Grados de metilación – algunas endonucleasas son inhibidas por metilación.
g) Tipo de molécula de DNA – si el DNA no tiene la secuencia que es reconocida por la enzimaaccesible, esta no puede cortar el material genético (ej. si el DNA está superenrrollado el lugar de restricción no va a estar accesible para la enzima).
h) Buffer adecuado – este provee el ambienteque necesita la enzima para trabajar en condiciones óptimas.
5- ¿Qué es un mapa de restricción?
Un diagrama de una molécula de DNA en donde se muestran los sitios de corte de las enzimas de restriccióny sirve para:
Hacer mapa de restricción de un plásmido o bacteriófago.
Fragmentar DNA genómico para separación de electroforesis y “Southern Blot”.
Generación de fragmentos para ser usados como...