ratones transgenicos

Páginas: 5 (1100 palabras) Publicado: 10 de febrero de 2015
En el lapso de tres años, 1980-1982, la noción de expresión de proteínas extranjeras en ratones fue de una idea a una realidad. Durante este tiempo, varios laboratorios trabajaron furiosamente para introducir nuevos genes y expresan proteínas exógenas, primero en las células madre embrionarias de ratón y luego en ratones adultos. Ralph Brinster y Richard Palmiter estuvieron entre los pioneros eneste campo cuando, en 1981, demostró por primera vez la expresión de un gen viral en un ratón transgénico robusta.
Fondo una poderosa metodología para el estudio de los genes y las proteínas que codifican es la expresión controlada en las células y organismos enteros. Antes del advenimiento de técnicas de ADN recombinante, los biólogos esto logran por inyectables mRNA extranjeros en ovocitos deranas y estudiar la actividad biológica de la proteína codificada por el mRNA extranjeros. En la década de 1970 y 1980, la revolución de la biología molecular permitió genes estar fundida a promotores específicos, que permitan expresar en línea celular. Considerando que los biólogos se convirtieron capaces de estudiar la función de genes en células cultivadas, querían estudiar genes en unorganismo vivo. Esto requiere la expresión de un gen específico de extranjero en las células embrionarias, llevando a la introducción del gen extranjero en genoma del animal y el examen de su función en el organismo. En la década de 1970, Brinster demostró que los genes extranjeros pudieran expresarse en ratones inyectando las células cancerosas en forma embrionaria temprana conocida como blastocisto.Este enfoque, sin embargo, hizo difícil de expresar un gen específico en los tipos celulares deseados. Esto requeriría que la introducción del gen en el genoma del ratón. En 1980, los biólogos demostraron que esto era posible mediante la inyección de una estafa de plásmido
formación ADN viral en óvulos fecundados de ratón, luego detectar las secuencias virales en los ratones recién nacidos. Estopreparó el terreno para determinar si una proteína funcional podría ser expresada desde un gen extranjero incorporado en el genoma del ratón.
Desafío de Brinster experimento fue diseñar el experimento de tal manera que se podría fácilmente e inequívocamente demostrar que el ratón estaba haciendo la proteína extraña. Para lograr esto, Brinster eligió expresar una enzima fácilmente ensayada en lugarde una proteína de mayor interés biológico en su primer ratón transgénico. Eligió la timidina kinasa de enzima de los virus del herpes simple (HSV), la elección de los cuales ofrece varias ventajas. En primer lugar, el gen proviene de un virus humano; así su secuencia suficientemente diferenció del gen endógeno del ratón para permitir su integración en el genoma del ratón fácilmente ser demostrada.En segundo lugar, la actividad de la timidina kinasa puede ensayarse fácilmente siguiendo la conversión de marcada radiactivamente timidina a timidina monofosfato. Por último, un inhibidor de la actividad de la cinasa de la timidina HSV que no inhibe la enzima endógena del ratón estaba disponible, permitiendo a los investigadores controlar específicamente la actividad de la proteína extraña. Losgenes se expresan de secuencias de ADN contra la corriente de proteína-codificación regiones denominadas promotores. Promotores de control donde y cuando un gen se expresa. Para expresar un gen viral en un ratón requiere que el biólogo Retire el control del promotor viral del gene y fusionarlo a un promotor que está activo en células de ratón. Brinster colaboró con Palmiter, quien había estadoestudiando el promotor de la metalotioneína ratón-1 (MT-1)
Gene. Palmiter fusionados con el promotor MT-1 para el gen de la cinasa de la timidina HSV. Entonces podría preguntan si una proteína viral podría ser expresada en un ratón. Para generar el ratón transgénico, Brinster y Palmiter inyectan el plásmido contiene HSV timidina kinasa fusionado al promotor de MT-1 en los pro-núcleos de huevos...
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