Reactor en Serie

Geraldine Rivera Camacho A01155505
Ismael Rodríguez Rodríguez A01088636
Evangelina Garza Elizondo A01089869

Cultivo de Tejidos
Dora Elia Hernández
Actividad Integradora
Solución situación I

Para el caso 1 utilizamos como explante una hoja de la planta madre a propagar. La preparación del material vegetal se llevó a cabo para los folíolos de hojas (1.5 cm aproximadamente) con:1) Desinfección con etanol 70% por veinte segundos 2) Luego sumergirlos en una solución de hipoclorito de sodio al 10% durante 3 minutos y 3) 3 lavados posteriores con agua destilada estéril. Se utiliza la técnica de micropropagación de organogénesis indirecta para promover la formación de callo. Para ello, se cultivó en tubos de vidrio, conteniendo 3 ml. del medio MS (Murashige & Skoog, 1962)suplementado con los fitorreguladores auxinas y citoquininas en una proporción 3:1, para promover la aparición de callo. Después de la aparición del callo en los explantes se cortan del cultivo y se traspasan a tubos con el medio de cultivo de callos para la organogénesis, el cual consistió en medio MS suplementado con 5mg·l-1 BA y 0,5mg·l-1ANA. A partir de este se obtienen los brotes que seráncultivados en medio MS suplementado con diferentes concentraciones y combinaciones entre benciladenina (BAP), hemisulfato de adenina (SA) y cinetina (CIN). El pH de los medios fue ajustado a 5,8, antes del agregado de 0,7 % de agar. Los cultivos (obturados con Resinite AF 50) fueron incubados en oscuridad a 27 ± 2oC.

Solución situación II

Primero es necesario darle una termoterapia a la plantamadre con temperaturas entre 30 y 40°C por varios días (al menos por 2 semanas hasta por 12) para retardar la multiplicación del virus y dar paso a el desarrollo de tejidos sanos. Para las condiciones de esterilidad del explante se utilizarán las siguientes soluciones: 1) 10% de Hipoclorito durante 20min + 1% de Bicloruro de Mercurio durante 5 min 2) 20% de Hipoclorito por 10 min + 1% de Biclorurode Mercurio por 5min 3) 10% Hipoclorito 10 min + 0.5% Bicloruro de Mercurio por 5 min. La técnica de micropropagación por organogenesis directa a través de yemas axilares es la base de la propagación masiva de plátano, sin embargo debido a la falta de yemas se usará explante de hoja. Se utilizará el medio de cultivo MS enriquecido con hormonas como auxinas (baja proporción) al igual quecitoquininas, que estimulan el desarrollo de brotes adventicios, formación de raíces y tallos. Después de la formación de brotes éstos se separarán de manera aséptica y se subcultivan individualmente en el mismo medio de cultivo, es necesario eliminar tejidos necróticos externos y hojas desarrolladas, el brote debe mantenerse mínimo de 1cm de longitud, después se realiza un corte longitudinal a través delápice y éste se cultiva separadamente. Los subcultivos pueden mantenerse indefinidamente si se cambia el medio de cultivo semanalmente. Los brotes externos más desarrollados pueden usarse para enraizar y los más pequeños son usados para mantener el cultivo. Para el desarrollo de los brotes y su enraizamiento se seleccionan aquellos que tengan una longitud de aproximadamente 2cm y se transfieren a unmedio MS suplementado con 1mg/L de AIA, se incuban durante dos semanas a 30ºC y 16 horas de luz por día, después de que se alcance una longitud de 6cm y se aprecien las raíces bien desarrolladas se puede transportar el brote al exterior.

Solución situación III

En primera instancia verificar el tipo de semilla que es. Si el tipo de semilla lo permite se mantendrán las semillas encrioconservación en nitrógeno líquido a temperaturas entre -20 y -196°C, similares a las que utilizan los grandes bancos de semillas, si son semillas recalcitrante, entonces no se podrá trabajar a baja humedad ni a bajas temperaturas. Considerando que sí pueden mantenerse en frío, a la hora de trabajar se procurará sacar del congelador sólo las semillas necesarias y no el conjunto de las únicas 10...