Recuento plaquetario
Páginas: 7 (1674 palabras)
Publicado: 10 de julio de 2014
HEPA 2013
Recuento plaquetario:
comparación entre recuentos manuales y automáticos
Introducción
Las plaquetas se producen a partir de vesículas que se desprenden de la membrana externa de los megacariocitos . La participación activa de las plaquetas se da durante los procesos de hemostasia y trombosis. Estos procesos deben ser tomados en cuenta a la hora de diagnosticar, tratar eincluso efectuar cirugías de rutina en un paciente. Sin la realización de un recuento plaquetario confiable, el resultado durante cualquiera de estos eventos podría no ser el deseado.
Por esta razón, es fundamental conocer los métodos de recuento de plaquetas y ser criteriosos al momento de decidir qué método de conteo es el más fidedigno.
En el presente trabajo se hará una revisiónbibliográfica comparando los diferentes métodos de recuento plaquetario, sus ventajas y desventajas.
Metodología
Toma de muestra
La muestra debe ser extraída con anticoagulante; entre ellos, el que presenta mejores propiedades para el almacenamiento de la muestra es la sal dipotásica del ácido etilendiaminotetracético (K2EDTA), en una concentración entre 1,5 mg/mL de sangre.
El EDTA es elanticoagulante que mejor conserva las células sanguíneas y actúa por ser quelante del calcio de la muestra. En contraste, la heparina litio para hemograma no es lo mejor, ya que no preserva bien la morfología celular y se producen con más frecuencia los agregados plaquetarios (1)(5).No obstante, el EDTA puede producir el fenómeno de "satelitosis ", en el que las plaquetas se adhieren a los neutrófilos yforman un anillo.Éste defecto se puede corregir utilizando citrato de sodio como anticoagulante. (4)
Recuento plaquetario
El recuento de plaquetas se puede realizar por medio de un hemocitómetro o cámara contadora, o a través de contadores automáticos .
Recuento celular manual y análisis citológico
El principio del recuento celular es similar para leucocitos, eritrocitos, plaquetas yeosinófilos; sólo varían la dilución, el líquido diluyente y el área contada. De hecho, cualquier partícula (ej. espermatozoides) puede contarse con este sistema. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer, específicamente en el retículo de Thomas.
Específicamente , para el recuento plaquetario, se utiliza muestra de sangre anticoagulada con EDTA, la cual es diluida (1:100) con oxalato deamonio al 1% que lisa los eritrocitos no nucleados(4). Después de 20 minutos de “cargada” la cámara se hace el recuento con objetivo 40x. El número de plaquetas se obtiene con la siguiente fórmula:
Recuento de plaquetas: Número de células contadas x factor de dilución 10
Los recuentos celulares manuales se realizan mediante un hemocitómetro o una cámara contadora, y las diluciones se hacen amano con dispositivos de dilución automáticos, como Unopettes(1).
Hemocitómetro o cámara contadora:
La más común es la de Levy con retículo de Neubauer mejorado. Está compuesta por dos superficies elevadas, cada una de ellas de forma cuadrada de 3mm x3mm (sup. de 9 mm totales) separadas por una hendidura en forma de H. este cuadrado grande presenta 9 cuadrados de 1x1mm, y cada uno de éstos seencuentra subdividido en 16; el cuadrado central está subdividido en 25 pequeños. Cada uno de estos cuadrados más pequeños tiene 1/25 o 0.04mm². Encima de las superficies de recuento se coloca un cubreobjetos. La distancia entre cada superficie de recuento y el cubreobjetos es 0.1mm; por lo tanto, el volumen total es 0.9mm³. Los hemocitómetros y los cubreobjetos deben cumplir las especificacionesdel National Bureau of Standars, indicado por las iniciales NBS en la cámara (4).
Una vez que se comprendieron por completo las dimensiones del hemocitómetro, el área contada puede modificarse para facilitar el conteo en muestras con recuentos muy bajos o altos.
Sistema Unopette:
Los Unopette son dispositivos para la dilución automático, que eliminó muchos errores de pipeteo y tornó más...
Recuento plaquetario:
comparación entre recuentos manuales y automáticos
Introducción
Las plaquetas se producen a partir de vesículas que se desprenden de la membrana externa de los megacariocitos . La participación activa de las plaquetas se da durante los procesos de hemostasia y trombosis. Estos procesos deben ser tomados en cuenta a la hora de diagnosticar, tratar eincluso efectuar cirugías de rutina en un paciente. Sin la realización de un recuento plaquetario confiable, el resultado durante cualquiera de estos eventos podría no ser el deseado.
Por esta razón, es fundamental conocer los métodos de recuento de plaquetas y ser criteriosos al momento de decidir qué método de conteo es el más fidedigno.
En el presente trabajo se hará una revisiónbibliográfica comparando los diferentes métodos de recuento plaquetario, sus ventajas y desventajas.
Metodología
Toma de muestra
La muestra debe ser extraída con anticoagulante; entre ellos, el que presenta mejores propiedades para el almacenamiento de la muestra es la sal dipotásica del ácido etilendiaminotetracético (K2EDTA), en una concentración entre 1,5 mg/mL de sangre.
El EDTA es elanticoagulante que mejor conserva las células sanguíneas y actúa por ser quelante del calcio de la muestra. En contraste, la heparina litio para hemograma no es lo mejor, ya que no preserva bien la morfología celular y se producen con más frecuencia los agregados plaquetarios (1)(5).No obstante, el EDTA puede producir el fenómeno de "satelitosis ", en el que las plaquetas se adhieren a los neutrófilos yforman un anillo.Éste defecto se puede corregir utilizando citrato de sodio como anticoagulante. (4)
Recuento plaquetario
El recuento de plaquetas se puede realizar por medio de un hemocitómetro o cámara contadora, o a través de contadores automáticos .
Recuento celular manual y análisis citológico
El principio del recuento celular es similar para leucocitos, eritrocitos, plaquetas yeosinófilos; sólo varían la dilución, el líquido diluyente y el área contada. De hecho, cualquier partícula (ej. espermatozoides) puede contarse con este sistema. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer, específicamente en el retículo de Thomas.
Específicamente , para el recuento plaquetario, se utiliza muestra de sangre anticoagulada con EDTA, la cual es diluida (1:100) con oxalato deamonio al 1% que lisa los eritrocitos no nucleados(4). Después de 20 minutos de “cargada” la cámara se hace el recuento con objetivo 40x. El número de plaquetas se obtiene con la siguiente fórmula:
Recuento de plaquetas: Número de células contadas x factor de dilución 10
Los recuentos celulares manuales se realizan mediante un hemocitómetro o una cámara contadora, y las diluciones se hacen amano con dispositivos de dilución automáticos, como Unopettes(1).
Hemocitómetro o cámara contadora:
La más común es la de Levy con retículo de Neubauer mejorado. Está compuesta por dos superficies elevadas, cada una de ellas de forma cuadrada de 3mm x3mm (sup. de 9 mm totales) separadas por una hendidura en forma de H. este cuadrado grande presenta 9 cuadrados de 1x1mm, y cada uno de éstos seencuentra subdividido en 16; el cuadrado central está subdividido en 25 pequeños. Cada uno de estos cuadrados más pequeños tiene 1/25 o 0.04mm². Encima de las superficies de recuento se coloca un cubreobjetos. La distancia entre cada superficie de recuento y el cubreobjetos es 0.1mm; por lo tanto, el volumen total es 0.9mm³. Los hemocitómetros y los cubreobjetos deben cumplir las especificacionesdel National Bureau of Standars, indicado por las iniciales NBS en la cámara (4).
Una vez que se comprendieron por completo las dimensiones del hemocitómetro, el área contada puede modificarse para facilitar el conteo en muestras con recuentos muy bajos o altos.
Sistema Unopette:
Los Unopette son dispositivos para la dilución automático, que eliminó muchos errores de pipeteo y tornó más...
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