regencia en farmacia


OBJETIVOS
Identificar por medio de la tinción las ciertas estructuras de la célula.
      
Conocer o manejo del microscopio óptico para la observación de bacterias (importancia del objetivo de inmersión).

Conocer y manejar las unidades de medida de la células establecer comparaciones entre tamaños de procariotas y de eucariotas.      
Reconocer los distintos  modelos de pared bacteriana.





















INTRODUCCION

La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a lasbacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella. Microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formadopor I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales están presente para solubilizar el yodo, y actúan de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve pararealizar la decoloración, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Después de la coloración de contraste las célulasGram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules. La safranina puede o no utilizarse, no es crucial para la técnica. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. Al término del protocolo, las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas, se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (sise usó, por ejemplo, safranina).

















MATERIALES          


Portaobjetos
Cubreobjetos
Colorantes: cristal violeta, lugol, safranina
Microscopio
Aceite de inmersión
Mechero
Asas


PROCEDIMIENTO
Preparar el frotis bacteriano.





Fijar el frotis.

Teñir con cristal violeta por 1 minuto.






Lavar con abundante agua el exceso de colorante.Cubrir el frotis con lugol por 1 minuto.
Lavar con abundante agua.
Decolorar con alcohol acetona por 5-30 segundos.
Lavar con abundante agua.
Dejar secar el aire o ayudándose con un papel absorbente.





Observar al microscopio, siguiendo recomendaciones dada.
Antes de observar en el microscopio debemos saber cada una de sus partes.







Graficarlas observaciones y clasificar de acuerdo a la tinción de Gram correspondiente.
Observaciones

Después de haber realizado cada una de la muestras en el laboratorio debemos tener en cuenta las precauciones a la hora de hacer el montaje para que no haya algo erróneo en las muestras o resultados obtenidos.

Saber cada una de las partes del microscopio y los cuidados que debemos tener en cuentaa la hora de utilizarlo.

Observar con el objetivo 4x y sacar foto

Aumentar al objetivo a 10x observar y sacar foto

Aumentar al objetivo 40x y observar Sacar foto.



Clasificación de tinción de Gram:
La coloración obtenida con Gram negativo es roja o rosada.


Y la de Gram positiva es morada.


QUE ES UNA BACTERIA





La palabra bacteria proviene de un término...