REPORTE 4 MICROBIOLOGIA

Practica #4

Pruebas Bioquimicas

Lic. Cristabel Muñoz
Jacqueline Karina Hernández Beltrán.
Practica #4

Introducción.

En la siguiente practica se realizaron pruebas bioquímicas utilizando diferentes métodos en el
laboratorio, uno de los métodos usados fue el TSI, este es un medio universal utilizado para la
diferenciación de enterobacter, en base a la fermentación de glucosa, lactosa, sacarosay a la
producción de ácido sulfhídrico; la lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono
fermentables, el tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido
sulfhídrico, el sulfato de amonio y de hierro, es la fuente de Fe3+, las cuales se combinan con
el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro.
Por fermentación de azucares, se producenácidos, que se detectan por medio del indicador
rojo de fenol, el cual vira en color amarillo en medio acido; todo lo mencionado anteriormente
es el resultado del proceso que se realiza al utilizar el método de TSI (triple azúcar), más
adelante en los resultados se detallan lo que se originó en nuestra prueba bioquímica.
Otro de los métodos que se utilizó en la práctica fue el IMViC que consta de unaserie de
procedimiento dentro de una misma, para detallar un poco en lo que consiste este método es
necesario especificar el significado de cada sigla que constituye la palabra IMViC.
Indol (I) este posee diferentes características dentro de ellas, como unas subcategorías las
cuales son representadas por las siglas SIM; este es un medio solido que identifica la presencia
de ácido sulfhídrico, si lasbacterias analizadas poseen movilidad negativa o positiva; entre
otras funciones que más adelante observaremos al momento de estar analizando los resultados,
ya que el uso de este puede generar en nuestro tubo de ensayo un anillo de color purpura en la
superficie o un anillo amarillo pálido, pero esto básicamente va a depender del tipo de bacterias
que se estén analizando.
Rojo de Metilo (M) Estebásicamente iban a estar constituidos por el rojo de metilo. Es un medio
usado para la identificación de enterobacteriaceae en base a su movilidad, actividad de ornitina
decarboxilasa y producción de indol, es un medio de cultivo semisólido, altamente nutritivo
debido a la presencia de extracto de levadura, peptona y triptenia; por su composición es
posible detectar 3 reacciones.
En el vogesproskauer (Vi) estudia la fermentación butanodíolica con formación de un
metabolismo intermediario neutro, para este es empleado un reactivo llamado Erlich, el cual
es agregado luego de pasadas 24 horas en que la muestra esté en condiciones adecuadas y
controladas.
Citrato (C) este es un medio solido cuyo indicador es el azul de bromotimol, un microorganismo
que puede utilizar el citrato como únicafuente de carbono, también utiliza las sales de amonio
del medio como única fuente de nitrógeno, dando como resultados que los tubos de ensayos
contenidos con citrato den una coloración verde o azul, si resulta un color azul se dirá que es
positiva pero si se obtiene un color verde es negativo. Al finalizar este método se tienen 5 tubos
de ensayos, cada uno con características totalmente diferentes,observando su coloración, si
posee gas, si existe movimiento o no en ellas, entre otras cosas. En la sección de los resultados
de este artículo se podrán apreciar cada uno de ellos y las características que se obtuvieron.

Objetivos.
Objetivo General.
Conocer los diferentes métodos o técnicas que se realizan en las pruebas bioquímicas
e interpretar los resultados obtenidos.

ObjetivosEspecíficos.
1. Realizar la preparación de los medios de cultivos correctamente.
2. Deducir en base a la teoría los resultados obtenidos en las muestras.
3. Detallar en qué consisten los métodos TSI y el IMViC.

Materiales.
1. 5 tubos de ensayo con su respectivo tapón.
2. Medios:
 Simón Citrato Agar.
 SIM.
 Rojo de Metilo /Vogue Proskauer.
 TSI.
3. Mechero
4. Jeringas de 3ml y de 10ml
5. Agua...