Reporte De Pr Ctica 5 BMC

Reporte de práctica
“Aislamiento del ADN”

Integrantes del equipo: Juan Abraham Flores Morales, Ana Lidia Antonio Flores, Luis Manuel Tecpa Márquez, Cristian Luna Bonilla, Luis Miguel Ortega Vázquez
Nombre del reporte de práctica: “Aislamiento del ADN”
Fecha de entrega: 6 de Julio de 2015
Institución educativa: Universidad Politécnica de Tlaxcala
Carrera: Biotecnología
Grupo: 3° “B”Facilitador: M. en C. Gabriela Vargas Oliver
Asignatura: Biología Celular y Molecular

Introducción
En 1868 el investigador suizo Johann Friedich Miescher viajo a Tübingen Alemania para iniciar sus investigaciones del núcleo celular. Para aquel entonces los núcleos de las células eran difíciles de separar del citoplasma circundante. Para facilitar su trabajo Miescher trabajo con células de la pus, ya quetienen núcleos grandes sin mucho citoplasma (obtenía el material de las vendas utilizadas en las heridas). En 1869 Miescher encontró una nueva sustancia inesperada, con abundante fósforo y formando aparentemente por moléculas muy grandes a la que nombró “nucleína”. Debido a que no se conocía ninguna sustancia parecida a la descubierta por Miescher, su jefe Ernst Félix Hoppe-Seyler, investigador quiendio nombre a la hemoglobina, fundador y editor de la primera revista de Bioquímica, repitió el experimento antes de publicar los resultados de su estudiante en su revista. Lo que Miescher había descubierto era lo que hoy en día conocemos como Cromatina, un complejo de ADN y proteínas, aunque fue reconocida hasta 1943 gracias al experimento realizado por Oswald Avery.
La estructura del ADN es unapareja de largas cadenas de nucleótidos. La estructura de doble hélice del ADN fue descubierta en 1953 por James Watson y Francis Crick. Una larga hebra de ácido nucleico está enrollada alrededor de otra hebra formando un par entrelazado. Dicha hélice mide 3,4 nm de paso de rosca y 2,37 nm de diámetro, y está formada, en cada vuelta, por 10,4 pares de nucleótidos enfrentados entre sí por sus basesnitrogenadas
La extracción consiste en el aislamiento y purificación de moléculas de ADN y se basa en las características fisicoquímicas de la molécula. El ADN está constituido por dos cadenas de nucleótidos unidas entre sí formando una doble hélice. Los nucleótidos están integrados por un azúcar (desoxirribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada (adenina, guanina, timina o citosina). Launión de los nucleótidos ocurre entre el grupo fosfato y el azúcar, mediante enlaces fosfodiéster, dando lugar al esqueleto de la molécula. Las bases de cadenas opuestas se unen mediante puentes de hidrógeno y mantienen estable la estructura helicoidal. Los grupos fosfato están cargados negativamente y son polares, lo que le confiere al ADN una carga neta negativa y lo hace altamente polar,características que son aprovechadas para su extracción. Los grupos fosfato tienen una fuerte tendencia a repelerse, debido a su carga negativa, lo que permite disolver al ADN en soluciones acuosas y formar una capa hidratante alrededor de la molécula.
El aislamiento del ADN es el principio de muchos métodos usados en la ingeniería genética, como la transformación, secuenciación, mapeo físico, mutagénesissitio dirigidas, etc. El aislamiento de los ácidos nucleicos implica la destrucción de la célula por choque osmótico; homogeneización, digestión enzimática o tratamiento mecánico suave.

Objetivo
El alumno aislará y observará el ADN extraído de forma rudimentaria.

Materiales e insumos
Mortero y pistilo
Aplicadores de madera o palillos
Tubos de ensayo de 15 X 125 mm
Probeta de 250 ml
Muestrabiológica: ajo, jitomate, cebolla o fresas.
Pipeta de 10 ml
Agitador (vortex)
Pipeta Pasteur
bulbo
Par de guantes de látex
Varilla de vidrio
Vaso de precipitado de 250 ml
Papel filtro
Centrifuga
Propipeta
Bandeja de metal o hielera de unicel
Tubo de ensaye de 13 X 100
Piseta con agua destilada
Agua destilada
Detergente líquido o champú
Bicarbonato de sodio
Alcohol isoamilico...