Respiración Mitocondrial

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA

BIOLOGÍA

BIOLOGÍA CELULAR Y BIOQUÍMICA

PRACTICA 3
RESPIRACIÓN EN MITOCONDRIA DE GERMINADO DE FRIJOL MUNGO

EQUIPO 5:
JASSO MALDONADO LUIS FERNANDO
JIMÉNEZ RIVAS RUBÉN
REYES SOLÍS JOSÉ ROGELIO
RUÍZ CEJA KARLA ALEJANDRA
SOBERANES ALMARAZ SALVADOR

GRUPO: 1354

INTRODUCCIÓN
          El flujo deelectrones en las reacciones de oxido-reducción es responsable, directa o indirectamente de todo el trabajo realizado en los organismos vivientes. En los organismos no fotosintéticos, las fuentes de electrones son compuestos reducidos; en los organismos fotosintéticos, el donador inicial de electrones es una especie química excitada por la absorción de la luz solar. El flujo de los electrones enel metabolismo es un proceso complejo, los electrones se mueven a partir de varios metabolitos intermedios a acarreadores de electrones especializados en las reacciones catalizadas por enzimas. Posteriormente, los acarreadores donan los electrones a aceptores con elevadas afinidades por los electrones, este último proceso genera energía. Las células contienen una variedad de transductores deenergía, los cuales convierten la energía del flujo de electrones en trabajo.
El transporte de electrones, es la fuente principal de energía para las actividades celulares, libera grandes cantidades de energía libre, la mayor parte de la cual se almacena en forma de ATP en la fosforilación oxidativa (Voet, 2006). Las enzimas que catalizan este proceso, son generalmente más complejas tantoestructuralmente como en su mecanismo catalítico que las enzimas de las otras vías metabólicas, y por tanto son menos conocidas. La mayoría están en la membrana interna mitocondrial, por lo cual es complicada su extracción y purificación. Tampoco es bien conocido cómo la liberación de energía libre que se produce durante el transporte de electrones se conserva y transforma en la energía del enlace fosfatodurante la fosforilación oxidativa y las síntesis del ATP. Por lo anterior, estas enzimas son un modelo de estudio muy atractivo.
 El resultado final de las rutas metabólicas es la producción de dos donadores de electrones: NADH y FADH2. Los electrones de estos dos donadores son transportados a través de la cadena transportadora de electrones hasta el oxígeno, el cual se reduce para formar agua. Éstees un proceso con múltiples etapas que ocurren en la membrana mitocondrial interna. Las enzimas que catalizan estas reacciones tienen la capacidad de crear simultáneamenteun gradiente de protones a través de la membrana.  
La cadena está formada principalmente por 4 complejos enzimáticos y varios transportadores:

La obtención de ATP como consecuencia de la formación de un gradientequimiosmótico constituye la hipótesis quimiosmótica (Mitchell, 1961). Según ésta teoría, la energía liberada en el transporte de electrones, se emplea para bombear protones en contra de gradiente electroquímico, al espacio inter-membranoso en las mitocondrias, y al espacio tilacoidal en los cloroplastos.

OBJETIVOS
* Aislar de mitocondrias de germen de soya
* Cuantificar proteínas en mitocondriasde células de germen de soya.
* Cuantificar el consumo de oxígeno en suspensión de mitocondrias de germen de soya por medio del oxígrafo.

METODOLOGÍA
A) Aislamiento de Mitocondrias de Germinados de Frijol Mungo

B) Cuantificación De Proteína Mitocondrial.

C) Calibración Del Oxígrafo y Registro De Actividad

D) Cálculos De Parámetros Respiratorios
CR=Velocidad de consumo de O2 enpresencia de ADP Velocidad de consumo de O2 en ausencia de ADP

RESULTADOS
Cálculos De La Regresión Lineal De La Gráfica 1 | |
| | | |
X | Y | | |
0 | 0 | | A= 0.0171 |
0.05 | 0.085 | | B= 1.2534 |
0.1 | 0.1447 | | R= 98.94% |
0.15 | 0.2128 | | R2= 97.90% |
0.2 | 0.2562 | | |
0 | 0.2743 | | |

Gráfica 1. Curva Patrón Para La Cuantificación De Proteína...