Segundo Previo Bio Vegetal
Páginas: 5 (1169 palabras)
Publicado: 1 de septiembre de 2011
1. Defina las concentraciones mínimas y máximas que se pueden alcanzar en un cultivo de células en suspensión. Señale el tiempo de generación promedio y la cantidad de divisiones aproximadas que se efectúan.
Un cultivo de células en suspensión es un conjunto de células aisladas, que van de 2 a 100 células que se distribuyen en el cultivo líquido, se realizan entre 4-6 divisionesaproximadamente y el tiempo varia entre 16-20 días.
2. Señale las tres pruebas de calidad básicas que se realizan a las células en suspensión. Enumere los métodos para llevar a cabo cada una de ellas y explíquelos brevemente.
* Determinación del peso fresco y del peso seco: para el peso fresco, se toma papel filtro prepesado y se colocan 5 mL de suspensión celular sobre el, se lavan las células conagua destilad al vacío y se vuelve a pesar el papel filtro, la diferencia entre las dos pesadas, es el peso fresco de la célula, para la segunda, el proceso es igual pero luego el disco de papel de filtro se seca en una incubadora a 60°C. durante 12 horas, se necesita un buen número de muestras para obtener un resultado adecuado.
* Volumen total de paquete de células: se transfiere volumenconocido de una suspensión celular a un tubo de centrifugación de 15 mL. Luego se centrifuga a 200g durante 5 minutos, siendo el volumen del paquete el pelet formado y se expresa en mililitros de células del pelet/mililitro de medio de cultivo.
* Numero de células: es la mas precisa, es simple pero tediosa, primero se desagregan los grupos de células, realizando un tratamiento con entre 5-15%de trióxido crómico. También se pueden romper los agregados celulares pasando la suspensión por una aguja de jeringa por 3-4 veces y luego contar.
3. Que es la efectividad en el plaque, como se calcula, cuando se considera buena efectividad. Es siempre beneficioso tener una buena efectividad. Explique su respuesta.
Es el número de colonias visibles por unidad de área o de placa, secalcula así:
Se considera que tiene buena efectividad, cuando la densidad celular es alta, siendo un número mayor de cero, entre mas alto sea, mayor será la efectividad. Si es importante, de ella depende la cantidad de colonias por milímetro2. Entre mas colonias se formen, mejor para el productor.
4. Por que es necesario filtrar la suspensión celular antes de plaquear.
Para el proceso, seusa un disco de papel filtro sobre el medio con agar, esto permite obtener una mayor formación de colonias.
5. Que es la embriogénesis repetitiva, como se logra, en que etapa de la E.S. se induce. Ventajas que ofrece.
La embriogénesis somática, es la formación de un embrión a partir de una célula, sin la necesidad de la fusión de gametos, la embriogénesis repetitiva es una característicade la embriogénesis somática, la cual consiste en la multiplicación indefinida del embrión somático. Se inicia en el proceso de maduración y germinación, se obtienen los embriones en estado de torpedo, y se colocan en un sistema de inmersión temporal, la maduración comienza cuando el embrión completa el proceso de histodiferenciación, y la célula se comienza a expandir. Puede ser necesaria laadición de acido absicico ayudando al embrión a acumular proteínas de reserva y se adicionan fuentes de carbono. Una vez lograda la germinación del embrión, se subcultiva a un nuevo medio de cultivo y se completa su crecimiento. Utilizando técnicas mejoradas como biorreactores, se pueden incrementar el número de plantas a obtener desde un solo embrión y así se disminuyen los costos de producción.6. Proponga un protocolo tentativo para obtener un elevado numero de plantas de palma de aceite con vistas a micropropagación, por E.S. señale: tipo de E.S. a emplear, explante inicial, fases: mencionarlas, explante, medios de cultivo, condiciones ambientales de crecimiento y condiciones especiales según etapa.
Procedimiento:
Elección de la planta y/o tejido donante de explantos....
Un cultivo de células en suspensión es un conjunto de células aisladas, que van de 2 a 100 células que se distribuyen en el cultivo líquido, se realizan entre 4-6 divisionesaproximadamente y el tiempo varia entre 16-20 días.
2. Señale las tres pruebas de calidad básicas que se realizan a las células en suspensión. Enumere los métodos para llevar a cabo cada una de ellas y explíquelos brevemente.
* Determinación del peso fresco y del peso seco: para el peso fresco, se toma papel filtro prepesado y se colocan 5 mL de suspensión celular sobre el, se lavan las células conagua destilad al vacío y se vuelve a pesar el papel filtro, la diferencia entre las dos pesadas, es el peso fresco de la célula, para la segunda, el proceso es igual pero luego el disco de papel de filtro se seca en una incubadora a 60°C. durante 12 horas, se necesita un buen número de muestras para obtener un resultado adecuado.
* Volumen total de paquete de células: se transfiere volumenconocido de una suspensión celular a un tubo de centrifugación de 15 mL. Luego se centrifuga a 200g durante 5 minutos, siendo el volumen del paquete el pelet formado y se expresa en mililitros de células del pelet/mililitro de medio de cultivo.
* Numero de células: es la mas precisa, es simple pero tediosa, primero se desagregan los grupos de células, realizando un tratamiento con entre 5-15%de trióxido crómico. También se pueden romper los agregados celulares pasando la suspensión por una aguja de jeringa por 3-4 veces y luego contar.
3. Que es la efectividad en el plaque, como se calcula, cuando se considera buena efectividad. Es siempre beneficioso tener una buena efectividad. Explique su respuesta.
Es el número de colonias visibles por unidad de área o de placa, secalcula así:
Se considera que tiene buena efectividad, cuando la densidad celular es alta, siendo un número mayor de cero, entre mas alto sea, mayor será la efectividad. Si es importante, de ella depende la cantidad de colonias por milímetro2. Entre mas colonias se formen, mejor para el productor.
4. Por que es necesario filtrar la suspensión celular antes de plaquear.
Para el proceso, seusa un disco de papel filtro sobre el medio con agar, esto permite obtener una mayor formación de colonias.
5. Que es la embriogénesis repetitiva, como se logra, en que etapa de la E.S. se induce. Ventajas que ofrece.
La embriogénesis somática, es la formación de un embrión a partir de una célula, sin la necesidad de la fusión de gametos, la embriogénesis repetitiva es una característicade la embriogénesis somática, la cual consiste en la multiplicación indefinida del embrión somático. Se inicia en el proceso de maduración y germinación, se obtienen los embriones en estado de torpedo, y se colocan en un sistema de inmersión temporal, la maduración comienza cuando el embrión completa el proceso de histodiferenciación, y la célula se comienza a expandir. Puede ser necesaria laadición de acido absicico ayudando al embrión a acumular proteínas de reserva y se adicionan fuentes de carbono. Una vez lograda la germinación del embrión, se subcultiva a un nuevo medio de cultivo y se completa su crecimiento. Utilizando técnicas mejoradas como biorreactores, se pueden incrementar el número de plantas a obtener desde un solo embrión y así se disminuyen los costos de producción.6. Proponga un protocolo tentativo para obtener un elevado numero de plantas de palma de aceite con vistas a micropropagación, por E.S. señale: tipo de E.S. a emplear, explante inicial, fases: mencionarlas, explante, medios de cultivo, condiciones ambientales de crecimiento y condiciones especiales según etapa.
Procedimiento:
Elección de la planta y/o tejido donante de explantos....
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