Sistemas con enzimas inmovilizadas
El enorme número de reacciones catalizadas por enzimas y la especificidad de las enzimas individuales significa que éstas son potencialmente de gran valorindustrial. Sin embargo, su costo se agudiza al aplicarlas como reactivos en forma soluble, pues se produce su pérdida, una vez utilizadas. Aunque la enzima por regenerarse en el proceso podría usarsemuchas veces, su separación a partir de la mezcla de reacción no es económicamente factible. De allí que ha significado un avance importante la posibilidad de inmovilizar las enzimas sobre soportesinertes, reteniendo así gran parte de su actividad catalítica original. Como las reacciones enzimáticas se desarrollan en medio acuoso, la matriz del soporte debe ser insoluble en agua, pero tan hidrófilaque garantice un buen contacto con el medio de la reacción.
Su aplicación se basa en sus interesantes propiedades:
a) Son térmicamente más estables que las enzimas nativas y más resistentes a laautolisis;
b) Al final de una reacción catalizada enzimáticamente, la enzima enlazada puede separarse por simple centrifugación o filtración, sin necesidad de agregar un reactivo de inactivación oprecipitación;
c) Una vez recuperada, la enzima enlazada puede volver a usarse las veces que se desea, sin pérdida sustancial de actividad después de un simple lavado con soluciones tampones acuosas ypermitiendo realizar así procesos enzimáticos continuos.
Por lo tanto, se usan también para aislar y purificar enzimas, al separarlas de inhibidores específicos.
5.1. Los métodos para la inmovilizaciónde enzimas comprenden las siguientes técnicas (l, 20)
a) Por adsorción de la proteína enzimática por la superficie de una matriz de soporte como silicagel, carbón, aluminio, vidrio poroso opoliaminas. La unión es relativamente débil, pudiendo destruirse por cambios en el pH, la temperatura o la concentración iónica; pero puede estabilizarse si la enzima ya adsorbida se somete a un entramado...
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