Tecnica De Separacion Capa Fina

RESUMEN
Las fitohormonas son sustancias endógenas bioactivas sintetizadas por las plantas en
concentraciones fisiológicas, con el fin de controlar diversos procesos metabólicos.
Dentro de este grupo de sustancias, dos de las más importantes por su incidencia en el
rendimiento y calidad de las cosechas son las Giberelinas (GAs) y las Auxinas. Diversas
técnicas cromatográficas como laCromatografía de Capa Fina (CCF), la Cromatografía
de Gases (CG) y la Cromatografía Líquida de Alta Resolución (CLAR) han sido utilizadas
para la determinación de fitohormonas. La CCF resulta ser una opción más sencilla y
económica, útil para el seguimiento de rutina de la fermentación. Se lograron establecer
dos métodos analíticos para la determinación cualitativa de Giberelinas y Auxinas en
caldosde fermentación como métodos alternativos más sencillos y menos costosos que la
CLAR. Para la CCF de GAs se utilizó una placa de Sílica gel G y como sistema de disolventes
cloroformo/acetato de etilo/ácido acético glacial (5:4:1). El revelador consistió en
una mezcla de ácido sulfúrico-etanol (95:5). Para las Auxinas se utilizó una placa de
Silica gel HF254 y como sistema de disolventesbenceno/acetato de etilo/ácido acético
(70:25:5). Se utilizó como revelador la disolución de Salkowski. Los métodos de análisis
por CCF, establecidos tanto para las GAs como para las Auxinas, permitieron definir que
la extracción líquido-líquido permite purificar de cierta manera los caldos de fermentación
y verificar la presencia de estos compuestos y otros metabolitos, en los caldos fermentados
yen sus extractos.
Palabras clave: giberelinas, auxinas, cromatografía de capa fina, determinación
INTRODUCCIÓN
Las fitohormonas son sustancias endógenas
bioactivas sintetizadas por las plantas
en concentraciones fisiológicas, con el fin
de controlar diversos procesos metabólicos.
Dentro de este grupo de sustancias, dos de
las más importantes por su incidencia en el
rendimiento y calidadde las cosechas son
las Giberelinas (GAs) y las Auxinas. Las primeras
influyen en diversos procesos como:
germinación de semillas, floración y espigamiento,
cuajado de los frutos y comportamiento
poscosecha de los mismos, siendo
la más importante la GA3 o Ácido
Giberélico. Las auxinas, por su parte, se
caracterizan por inducir alargamiento celular,
división celular, e iniciación de laraíz,
siendo el Ácido Indolacético (AIA) el miembro
más conocido de este grupo (1, 2).
El hecho de que varios microorganismos
como bacterias y hongos sean capaces de
sintetizar estas fitohormonas ha propiciado
su síntesis biotecnológica, siendo el empleo
de éstas en la agricultura una alternativa
compatible con el concepto de agricultura
sostenible, debido a su menor impacto en el
medioambiente y a que su obtención a
escala industrial resulta económicamente
más atractiva (3).
Diversas técnicas cromatográficas como
la Cromatografía de Capa Fina (CCF), la
Cromatografía de Gases (CG) y la
Cromatografía Líquida de Alta Resolución
(CLAR) han sido utilizadas para la determinación
de fitohormonas. El progreso alcanzado
durante la década del 60 en la separación
e identificación degiberelinas estuvo
relacionado con el desarrollo de la
Cromatografía sobre Capa Delgada o
Cromatografia de Capa Fina (CCF). Esta técnica
puede ser aplicada con fines preparativos,
pero ha sido establecida como procedimiento
más usual para fines analíticos (4).
Este método fue muy útil al inicio de las
investigaciones en este campo, ya que per-
ICIDCA No.1, 2007 13
ABSTRACT
Thephytohormones are bioactive endogenous substances synthesized by the plants in
physiological concentrations, with the purpose of controlling diverse metabolical processes.
Inside this group of substances, two of the most important for their incidence in the
yield and quality of the crops are the Gibberelins (GA) and the Auxins. Different chromatographic
techniques as the Thin Layer Chromatography...