tecnicas calrity

CLARITY es el nombre de una técnica que permite que órganos de seres vivos (extraídos del cuerpo) se vuelvan ópticamente transparentes y permeables a macromoléculas. Mediante una tinción adecuada se pueden ver las células individuales, así como estructuras intracelulares e incluso complejos protéicos (en el encéfalo de un ratón se pueden ver todas las neuronas, sus conexiones (conectoma), eincluso los neurotransmisores). Los órganos donados para investigación “renacen” gracias a esta nueva técnica, que sustituye al uso de cortes y a las técnicas de reconstrucción 3D basadas en tomografía. El vídeo de youtube que abre esta entrada no deja lugar a dudas, esta técnica será de uso común en los próximos años y nos permitirá disfrutar de cosas que hasta hoy sólo podíamos imaginar. El artículotécnico es Kwanghun Chung et al., “Structural and molecular interrogation of intact biological systems,” Nature, AOP 10 April 2013; recomiendo ver los 17 vídeos de la información suplementaria (a partir de los cuales se ha editado el vídeo youtube), merecen la pena. También recomiendo leer a Helen Shen, “See-through brains clarify connections. Technique to make tissue transparent offersthree-dimensional view of neural networks,” Nature 496: 151, 11 Apr 2013.

El órgano (o tejido) se enfría a 4 ºC, se sumerge en formol (folmaldehído) y se le realiza una infusión de un hidrogel (acrilamida y bisacrilamida). Te recuerdo que un hidrogel es una red de polímeros capaz de hincharse al absorber grandes cantidades de disolvente, siendo permeable a ciertos solutos. El formaldehído reticula eltejido y facilita que los monómeros del hidrogel se enlacen de forma covalente con las biomoléculas del tejido (proteínas, ácidos nucleicos y pequeños metabolitos). Para ello se incrementa poco a poco (durante 3 horas) la temperatura del tejido a 37 ºC, lo que facilita la hibridación del hidrogel y de las biomoléculas. El resultado es una estructura híbrida que mantiene estructuralmente el tejido ypermite la incorporación química de biomoléculas. Los lípidos no se hibridan a la red del hidrogel por lo que pueden ser extraídos mediante una técnica de limpieza con un detergente iónico; se aplican campos eléctricos a la muestra de tejido para acelerar el transporte del detergente iónico hasta las micelas y lípidos del tejido (aún así, el proceso de “limpieza” dura entre 5 y 9 días). Elresultado final es un órgano (o tejido) transparente a la luz que retiene las estructuras finas del tejido y que deja la mayoría de las biomoléculas en su lugar original.

Las técnicas convencionales de microscopia, tinción selectiva y reconstrucción tridimensional hacen el resto. Si no has visto aún el vídeo de youtube que abre esta entrada, debes verlo porque es realmente espectacular.


Ver loque pasa en el cerebro de forma transparente sin que los tejidos "molesten". Es lo que ha conseguido un equipo multidisciplinar de la Universidad de Stanford, en California, que ha desarrollado un método para estudiar el cerebro sin alterar su forma ni conexiones internas gracias a un proceso químico que lo hace transparente.
La técnica se denomina Clarity y podría ser utilizada para avanzar enenfermedades como el alzheimer, la esquizofrenia y arrojar luz sobre las neuronas vinculadas al síndrome de Down o al autismo. "El estudio de sistemas intactos con este tipo de resolución molecular y en toda su dimensión (ser capaces de ver el detalle más nimio y toda la estructura al mismo tiempo), ha sido un objetivo no alcanzado en la biología, una meta que Clarity empieza a cumplir", explicó KarlDeisseroth, ingeniero biológico, psiquiatra y jefe del proyecto.
El método de Deisseroth fue desvelado en un artículo publicado en internet por la revista Nature y ha sido testado fundamentalmente en ratones, aunque también se ha probado con éxito en el pez cebra y en muestras de cerebro humano.
Hasta ahora, estudiar el interior del cerebro implicaba seccionarlo, con la pérdida consiguiente...