Tecnicas de aislamiento bacteriano

Universidad de Concepción
Facultad de Ciencias Biológicas
Departamento de Microbiología

















TÉCNICAS DE AISLAMIENTO BACTERIANO

















Nombre: Oscar Benavides C.
Carrera: Biología
Asignatura: Microbiología
Profesor: Miguel Martínez P.
Ayudante: Paulina González M.
Karen Navarro J.Sección: 1
Fecha: 24-Abril-2013




Introducción

En la naturaleza, los microorganismos se encuentran formando poblaciones mixtas con otros tipos de microorganismos. Estas poblaciones mixtas son más o menos complejas. Sin embargo, el conocimiento de los microorganismos se consigue mediante el estudio de cepas aisladas; esto significa aislar la bacteria que interesa, separándola de los otrosorganismos que podrían coexistir en muestras complejas (alimentos, agua, suelo, etc.). Para lograr este acometido es necesario realizar técnicas de aislamiento bacteriano, el cual permite la obtención de un solo tipo de microorganismo, denominado cultivo puro. Estos últimos (cultivo puro) son indispensables para conocer las características morfológicas, actividad bioquímica, propiedades de tincióne identificación de especies microbianas, entre otras. El aislamiento de cultivos microbianos puede realizarse por diferentes métodos, sin embargo, los de uso más corriente son: a) por diseminación en superficie y b) aislamiento en medios selectivos.

Materiales Y Métodos

En placas con diferentes tipos de agar (R2A, sangre, MacConkey, telurito de K, cromogénico), se sembró pordiseminación, una muestra que contenía mezcla de bacterias. Para ello, se depositó una asada de muestra en la superficie de cada medio de cultivo (o agar), cerca del borde de la placa. Desde el borde de la placa se recorrió el agar siguiendo un trazado zigzagueante, utilizando la mayor superficie posible; de esta manera se disminuyo el contenido de bacterias en el instrumento de siembra, obteniéndoseasí colonias aisladas. Posteriormente cada medio de cultivo se incubo a 30°C. Luego de dos días se observó el desarrollo que presento cada medio de cultivo sembrado. Se reconocieron las diferentes colonias aisladas de forma macroscópica. Luego se preparó un frotis y tinción de Gram para cada tipo de colonia observada. Todo fue realizado en ambiente de esterilidad. Se observo cada preparación conobjetivo de inmersión.

Resultados
Tabla N°1: Caracterización de colonias puras sembradas en diferentes medios de cultivo
Medio de cultivo (Agar)
Color de las colonias
Tinción de Gram
Morfología microscópica
Agrupación
R2A
Blanquecino
Positiva (+) y
Negativa (-)
Bacilo
Cadena
Sangre
Gris oscuro
Positiva (+)
Esférica
Cadena

Gris claro
Negativa (-)
Bacilo
Aislados opares
MacConkey
Fucsia
Negativa (-)
Bacilo
Cadena

Rosado pálido
Negativa (-)
Esférica
Cadena
Telurito de potasio
Negro
Positiva (+)
Bacilo
Cadena
Cromogénico
Morado
Negativa (-)
Bacilo
Cadena

Blanquecino
Positivo (+)
Bacilo
Cadena

Discusión

Puesto que los microorganismos seencuentran en la naturaleza distribuidos de forma heterogénea, se hace necesario aislar las diferentes bacterias que se encuentran en cultivos o productos polimicrobianos. Existen diferentes métodos para realizar un aislamiento bacteriano, esto con el fin de lograr cultivos puros. Los cultivos puros están formados por un solo tipo de microorganismo; y son indispensables para conocer las característicasmorfológicas, propiedades de tinción, actividad bioquímica, patogenicidad, sensibilidad a antibióticos e identificación de las especies microbianas2.
Las bacterias deben ser cultivadas en medios de cultivo de laboratorio. Un medio de cultivo consta de un gel o una solución de diferentes compuestos, que contiene todos los elementos indispensables que requieren los microorganismos para crecer2....