Tecnicas histologicas

TÉCNICA HISTOLÓGICA
DEFINICIÓN:
La técnica histológica es una serie secuencial de pasos a través de los cuales una muestra de tejido llega a transformarse en delgados cortes coloreados capaces de ser observados al microscopio.

SINOPSIS GENERAL
PASO OBJETIVOS MEDIOS USUALES
Obtención o Proveer el material para su estudio al microscopio
 Biopsia
 Resección quirúrgica
 AutopsiaFijación o Preservar el material
o Evitar la autólisis
o Eliminar los microorganismos  Formol al 10 %
 Bouin
 Glutaraldehído
Inclusión o Embeber el material en un medio fácil de cortar en fetas muy delgadas  Parafina
 Acrílicos
 Resinas Epoxi
Corte o Lograr láminas muy delgadas que sean atravesadas por la luz  Micrótomo rotatorio
 M. de deslizamiento
Ultramicrótomo
Coloración o Visualizar los tejidos
o Identificar moléculas en ellos (Histoquímica)  Hematoxilina-eosina
 Tricrómicos
 Histoquímica
Montaje o Preservar el corte, manteniéndolo aislado del aire y deshidratado  Bálsamo del Canadá
 Medios plásticos

PASOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICA

OBTENCIÓN:
Consiste en la provisión del material que se desea estudiar por medio delmicroscopio.
El método seleccionado debe ser el adecuado para cada tipo de material. En todos los casos el instrumental con el cual se seccionan los tejidos debe estar muy afilado para evitar aplastar sus elementos, así como se debe evitar cualquier otro tipo de maltrato en su manipulación. Los principales métodos empleados son:

 La Biopsia: consiste en la extracción de pequeños fragmentos de tejidode un organismo vivo. Este procedimiento puede ser realizado de muy diversas formas, consideraremos algunas:
o biopsia incisional : se realiza seccionando con instrumentos cortantes como el bisturí
o biopsia por punch : el punch es un instrumento filoso con forma de sacabocados que se utiliza para tomar biopsias de piel.
o biopsia por punción : se realiza con agujas de biopsia y recientementetambién con agujas del tipo intramuscular (microbiopsia).
o biopsia endoscópica: se hace a través de endoscopios, que son instrumentos flexibles que permiten la observación de algunas cavidades internas del organismo.
 La Resección Quirúrgica: Cconsiste en la extirpación de órganos completos o de grandes partes de los mismos, a través de un procedimiento quirúrgico.
 La Autopsia o Necropsia:Es el examen de los órganos luego de la muerte, generalmente con el objetivo de determinar las causas de la misma.
Cualquiera sea el procedimiento empleado para la obtención, el material que resulta del mismo debe ser inmediatamente fijado o congelado para evitar los procesos de autodestrucción de las células conocidos como autolisis.

FIJACIÓN:
La fijación es en esencia un método para lapreservación de la morfología y la composición química de las células y los tejidos. Consiste en producir la muerte de las células, de manera tal que las estructuras que poseían éstas en el estado viviente se conserven con un mínimo de modificaciones, a lo largo del tiempo y de los subsiguientes pasos de la técnica. Asimismo algunos métodos tratan de conservar intacta su composición química. Lafijación debe realizarse inmediatamente de extraer las células del organismo, para evitar las lesiones agónicas ocasionadas por la anoxia, que inicialmente producen cambios osmóticos y luego alteraciones estructurales y bioquímicas más profundas, fenómenos conocidos en conjunto como autólisis. Por el mismo motivo los fijadores deben actuar sobre fragmentos relativamente pequeños de tejidos (como reglageneral menos de 1 cm cúbico), para que la difusión del fijador desde las superficies hasta la parte central del bloque tisular se haga en un tiempo reducido.
PROPIEDADES DE LOS FIJADORES
 Producen una rápida muerte celular, evitando la autólisis
 Preservan la morfología celular y tisular
 Preservan la composición química
 Penetran a los tejidos con relativa rapidez
 Facilitan la...