tecnicas histologicas

Técnicas histológicas:
INTRODUCCION
Es un conjunto de operaciones a que se somete una materia organizada, a fin de posibilitar su estudio al microscopio.
El examen al microscopio se hace generalmente por luz transmitida, lo que significa que la luz debe “atravesar” el objeto a examinar para llegar, después de haber pasado por las distintas lentes del aparato, a impresionar a nuestro órganovisual.
Por esa causa, debe ser reducido a láminas muy delgadas y transparentes, por las cuales lograremos efectuando una serie de operaciones.
1. EXAMEN INMEDIATO:
A) EN FRESCO (IN VIVO):
Puede ser hecho sin recurrir a los reactivos modificadores.
Ejemplo:
Organismos celulares, protozoarios, crustáceos, larvas, etc.
Se observan estructuras como citoplasma, el núcleo.
B) COLORACION:
Seinyecta ciertos colorantes, toxicidad relativamente baja para los animales vivos.
Ejemplo:
Rojo neutro, tiñe citoplasma, no núcleo.
Verde Jano, tiñe organoides celulares, mitocondrias.
Alizarina, se fija matriz ósea.
2. EXAMEN MEDIATO:
Se recurre a métodos más complejos de colorantes que exigen la muerte previa de las células.
PREPARACION DEL TEJIDO MUERTO:
Es necesario trabajar, con tejidosmuertos, conservantes.
Para luego ser seccionados en cortes histológicos.
OBTENCION DE LA MUESTRA:
El material a utilizar puede ser extraído de diversos animales.
Cuya obtención y crianza puede ser fácilmente efectuada en el laboratorio. Pueden provenir de:
Biopsias quirúrgicas
Material obtenido de necropsias
Utilizando animales de laboratorio.
Estudios experimentales en animalesMaterial de cultivo de tejidos
Frotis o extendidos
FASES EN LA OBTENCION DE MATERIAL ANIMAL:
MUERTE DEL ANIMAL.
Podemos producirla por un traumatismo brusco, o por la intoxicación.
EXTRACCION DE LOS ORGANOS: dirigirnos directamente a los órganos que nos interesan estudiar. Si son varios extraer primero los que más fácilmente se descomponen, páncreas y la porción inferir del tubo digestivo.REDUCCION A PIEZAS: Para el tamaño de las piezas debemos considerar las cualidades del fijador a usar.
OBTENCION DE MATERIAL:
NECROPCIAS: muestras que se obtienen de un cadáver. Para histología normal es necesario que se trate de un cadáver fresco y que no haya sido atacado por ninguna lesión.
BIOPSIAS: se obtienen de un sujeto con vida con el objeto de estudiarlos al microscopio y efectuar undiagnostico histopatológico.
MUESTRAS OPERADAS. Los tejidos que han sido extraídos de las intervenciones quirúrgicas, generalmente tumores u órganos inflamados.
FIJACION:
La fijación tiene por objeto conservarla estructura morfológica y química de las células y tejidos al estado vivo. Se llama fijadores a las sustancias químicas o a los agentes físicos que se utilizan para tal fin.
CUALIDADES QUEDEBE TENER UN FIJADOR:
Actuar con rapidez fijando a las células antes de que aparezcan los fenómenos agónicos o post-mortem (autolisis, desintegración)
Poseer alto poder de penetración hasta en las capas profundas de la pieza a fijar.
Conservar, en lo posible, los detalles estructurales que presentan in vivo.
Permitir o favorecer el empleo de los procedimientos necesarios ( ejecución decortes, coloración)
Impedir la desaparición de los elementos solubles durante la fijación o después de ella.
No provocar o impedir la producción de estructuras artificiales.
No retraer excesivamente los tejidos ni volverlos friables o quebradizos.
DESVENTAJAS:
Perdida de sustancias solubles, lípidos proteínas, polisacáridos.
Desplazamiento de algunos constituyentes celulares por difusión.Desnaturalización de proteínas, alteraciones físicas.
alteración química de las proteínas.
Destrucción de enzimas.

MANERA DE ACTUAR DE LOS FIJADORES:
Coagulando las proteínas sin combinarse con ellas (alcohol, ácido pícrico, yodo, calor)
Formando combinaciones químicas con las sustancias orgánicas (acido crómico y sus sales)
Reduciendo en contacto con las mismas y originando en su seno un...