Tecnicas Para Identificar Microorganismos En Leche Y Agua
Páginas: 8 (1904 palabras)
Publicado: 24 de febrero de 2013
ALUMNO: REY JOEL CRUZ.
FACILITADOR: FILOMENO RUIZ PEREZ
ESPECIALIDAD. LABORATORISTA QUIMICO
TECNICAS PARA IDENTIFICAR MICROORGANISMOS EN AGUA.
EL AGAR MCCONKEY
En cuanto a su composición por litro observamos 17 g de pancreático digestivo de gelatina; 1.5 g de pancreático digestivo de caseína, 1.5 de peptona de tejido animal; 10 g de lactosa; 1.5 g de sales biliares; 5 g de cloruroSódico; 0.03 g de rojo Neutro; 0.001g de cristal Violeta; 13.5 g de agar; y un pH de 7.1 (+ - 0.2º a 25º)
Los materiales que se usan son el polvo para la preparación de Agar McConkey, la pesa monoplano, el reloj de vidrio, la espátula, el matraz Erlenmeyer, agua destilada, la varilla de agitación, guantes de asbesto, el mechero, fósforos, una parrilla, algodón hidrófobo, y el uso de la autoclave. Latécnica que se sigue observa la lectura del envase del polvo de la preparación de Agar McConkey, de modo que haya por 1litro de preparación 500 gramos de polvo de preparación para después tratarlo en la autoclave durante 15 minutos a 121ºC; la colocación del reloj de vidrio sobre la pesa monoplano y se tara; el peso de 5gr de polvo de preparación; la introducción del polvo pesado en el matrazErlenmeyer y la limpieza del reloj de vidrio con agua destilada que igualmente ha de verterse en el interior del matraz a fin de mayor exactitud preparativa; la conducción de la preparación a aforo de 100ml con agua destilada; el uso de guantes de asbesto; la colocación del matraz sobre la parrilla sobre el mechero prendido; y el batimiento de la mezcla con la varilla de agitación y sin dejar queburbujee la mezcla. Tras la preparación y retirada de la parrilla, se procede con algodón hidrófobo al entaponamiento del matraz, a la colocación de papel sobre la boca del matraz y a su ajuste por medio de un elástico. En el papel hade reflejarse por escrito el tipo de medio de cultivo para luego conducirlo y depositarlo en la autoclave durante 45 minutos. Finalmente, y como es obvio se procederá a suretirada de la autoclave
• FILTRACIÓN POR MEMBRANA
El agua pasa a través de una membrana porosa para así reducir los Contaminantes del agua. Para disminuir los niveles de bacterias y
Protozoos, los poros de la membrana tienen que ser de, al menos, 45 micrones. (Los virus no se eliminan con este método.)
• TRATAMIENTO UV
El agua queda expuesta a luz ultravioleta (UV). La luz UVdestruye gran parte de los microorganismos nocivos en el agua, incluidos aquellos que se suelen encontrar en las aguas subterráneas (como algunos virus y bacterias).
• ÓSMOSIS INVERSA
El agua pasa a gran presión a través de un filtro de membrana con poros diminutos. De esta forma, se eliminan los minerales y los contaminantes, incluidos todos los microorganismos.
VOGES PROSKAUER:
Algunasbacterias producen acatilmetilcarbimol (producto intermedio en la degradación de la glucosa de los hidratos de carbono), que en presencia de
KOH y aire, se oxida para dar diacetilo, que reacciona con α-naftol y un producto de descomposición de la arginina de la peptona, para producir un color rojo.
En un tubo con agua de peptona y glucosa se siembran colonias aparecidas en las placas EMB Levine.TECNICA:
Se incuba a 37 ó 44 ºC 24-48 horas, luego se añade 1 mL de reactivo de
Voges Proskauer,que contiene α-naftol y KOH, se añade seis gotas de reactivo
o´mehara y dos de reactivo de Barry, se agita, se deja reposar 10-15 minutos y
si aparece una coloración roja la prueba es positiva.
MÉTODO DE MOHR
Técnica:
Se filtra el agua si contiene materias en suspensión. Se toman 100 ml de lamuestra (si el pH es inferior a 7 se añade 1 gramo de bicarbonato), se agrega 1 ml de cromato de potasio y se valora añadiendo gota a gota la solución de nitrato de plata hasta coloración apenas rojiza. Se resta 0,2 al número de ml empleados (gasto correspondiente al ensayo en blanco).
CALDO DE PEPTONA
INGREDIENTES, CANTIDADES
Peptona: 0,1g
NaCl: 0,85 g
Agua: 100 mL
PREPARACIÓN:...
FACILITADOR: FILOMENO RUIZ PEREZ
ESPECIALIDAD. LABORATORISTA QUIMICO
TECNICAS PARA IDENTIFICAR MICROORGANISMOS EN AGUA.
EL AGAR MCCONKEY
En cuanto a su composición por litro observamos 17 g de pancreático digestivo de gelatina; 1.5 g de pancreático digestivo de caseína, 1.5 de peptona de tejido animal; 10 g de lactosa; 1.5 g de sales biliares; 5 g de cloruroSódico; 0.03 g de rojo Neutro; 0.001g de cristal Violeta; 13.5 g de agar; y un pH de 7.1 (+ - 0.2º a 25º)
Los materiales que se usan son el polvo para la preparación de Agar McConkey, la pesa monoplano, el reloj de vidrio, la espátula, el matraz Erlenmeyer, agua destilada, la varilla de agitación, guantes de asbesto, el mechero, fósforos, una parrilla, algodón hidrófobo, y el uso de la autoclave. Latécnica que se sigue observa la lectura del envase del polvo de la preparación de Agar McConkey, de modo que haya por 1litro de preparación 500 gramos de polvo de preparación para después tratarlo en la autoclave durante 15 minutos a 121ºC; la colocación del reloj de vidrio sobre la pesa monoplano y se tara; el peso de 5gr de polvo de preparación; la introducción del polvo pesado en el matrazErlenmeyer y la limpieza del reloj de vidrio con agua destilada que igualmente ha de verterse en el interior del matraz a fin de mayor exactitud preparativa; la conducción de la preparación a aforo de 100ml con agua destilada; el uso de guantes de asbesto; la colocación del matraz sobre la parrilla sobre el mechero prendido; y el batimiento de la mezcla con la varilla de agitación y sin dejar queburbujee la mezcla. Tras la preparación y retirada de la parrilla, se procede con algodón hidrófobo al entaponamiento del matraz, a la colocación de papel sobre la boca del matraz y a su ajuste por medio de un elástico. En el papel hade reflejarse por escrito el tipo de medio de cultivo para luego conducirlo y depositarlo en la autoclave durante 45 minutos. Finalmente, y como es obvio se procederá a suretirada de la autoclave
• FILTRACIÓN POR MEMBRANA
El agua pasa a través de una membrana porosa para así reducir los Contaminantes del agua. Para disminuir los niveles de bacterias y
Protozoos, los poros de la membrana tienen que ser de, al menos, 45 micrones. (Los virus no se eliminan con este método.)
• TRATAMIENTO UV
El agua queda expuesta a luz ultravioleta (UV). La luz UVdestruye gran parte de los microorganismos nocivos en el agua, incluidos aquellos que se suelen encontrar en las aguas subterráneas (como algunos virus y bacterias).
• ÓSMOSIS INVERSA
El agua pasa a gran presión a través de un filtro de membrana con poros diminutos. De esta forma, se eliminan los minerales y los contaminantes, incluidos todos los microorganismos.
VOGES PROSKAUER:
Algunasbacterias producen acatilmetilcarbimol (producto intermedio en la degradación de la glucosa de los hidratos de carbono), que en presencia de
KOH y aire, se oxida para dar diacetilo, que reacciona con α-naftol y un producto de descomposición de la arginina de la peptona, para producir un color rojo.
En un tubo con agua de peptona y glucosa se siembran colonias aparecidas en las placas EMB Levine.TECNICA:
Se incuba a 37 ó 44 ºC 24-48 horas, luego se añade 1 mL de reactivo de
Voges Proskauer,que contiene α-naftol y KOH, se añade seis gotas de reactivo
o´mehara y dos de reactivo de Barry, se agita, se deja reposar 10-15 minutos y
si aparece una coloración roja la prueba es positiva.
MÉTODO DE MOHR
Técnica:
Se filtra el agua si contiene materias en suspensión. Se toman 100 ml de lamuestra (si el pH es inferior a 7 se añade 1 gramo de bicarbonato), se agrega 1 ml de cromato de potasio y se valora añadiendo gota a gota la solución de nitrato de plata hasta coloración apenas rojiza. Se resta 0,2 al número de ml empleados (gasto correspondiente al ensayo en blanco).
CALDO DE PEPTONA
INGREDIENTES, CANTIDADES
Peptona: 0,1g
NaCl: 0,85 g
Agua: 100 mL
PREPARACIÓN:...
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