Tinción De Bacterias

UNIVERSIDAD DE LAS AMÉRICAS
FACULTAD DE INGENIERIAS Y CIENCIAS AGROPECUARIAS
INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL Y DE ALIMENTOS

Fernanda Álvarez

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL

INFORME N°1

1.-TEMA:

TINCIÓN DE BACTERIAS

2.-OBJETIVOS:
2.1.Observar detenidamente las partes de internas y externas que intervienen en la reproducción de las diferente especies domésticas.
2.2.Aprendera preparar tinciones simples de bacterias.
2.3.Aprender a preparar tinciones diferenciales de Bacterias.
2.4.Observar las diferencias de bacterias Gram+ y Gram – mediante la
observación en el microscopio.
2.5. Poder clasificar las bacterias de acuerdo a su reacción con colorantes.

3.- GRÁFICO DEL EXPERIMENTO

NO DISPONIBLE

4. FUNDAMENTO TEÓRICO

BACTERIAS
“Microorganismounicelular procarionte, cuyas diversas especies causan las fermentaciones, enfermedades o putrefacción en los seres vivos o en las materias orgánicas.(RAE-2009)”
Las bacterias son muy simples por eso son procariotes, sin membrana nuclear, mitocondreas, aparato de Golgi ni retículo endoplasmático q se reproducen por división asexual; la diferencia de anchura en la pared celular de las bacterias lasdiferencia de ser gram positivas (capa gruesa de péptidoglucano) o gram negativas(capa delgada de péptidoglucano). Algunas bacterias carecen de pred delular y estas son las que viven dentro de una célula hospedera o dentro de un sistema hipertónico.
Las bacterias pueden ser temporales y permanentes eso depende de su morfología y su naturaleza.

BACTERAS GRAMPOSITIVAS
“Una bacteria grampositiva poseeuna pared celular gruesa que consta d varias capasy está formado principalmente por péptidoglicano (150-500 A) que rodea la membrana cito plasmática. El péptidoglucano es un elemento clave para la estructura, la replicación y la supervivencia de las células en las condiciones normalmente hostiles en las q proliferan las bacterias.”( MURRAY P., ROSENTHAL K., PFALLER M-2006).”

BACTERIASGRAMNEGATIVAS
“Las paredes celulares de las gramnegativas son más complejas que las de las grampositivas,…fuera de la membrana citoplasmática se encuentra un delgada capa de peptidoglucano que representa tan solo un 5% a un 10% del peso la pared celular. …La membrana externa mantiene la estructura bacteriana y construye un abarrera impermeable a moléculas de gran tamaño y moléculas hidrófobas.”( MURRAYP., ROSENTHAL K., PFALLER M.-2006).”

5. MATERIALES Y REACTIVOS
5.1. Materiales:

• Asas de laboratorio
• Microscopio
• Porta objetos
• Cubre objetos
• Mascarilla
• Mandil
• Guantes


5.2. Reactivos:
• Cepas de bacterias
• Agua destilada
• Etanol /cetona
• Azul de metileno
• Safranina
• Cristal violeta de genciana
• Lugol


6. PROCEDIMIENTO
6.1. PREPARACIÓN DE MUESTRAS ENGOTA FRESCA
a. MUESTRA LÍQUIDA:
1. Tomar una alícuota de la muestra.
2. Expandirla en un porta objetos y cubrirla con un cubreobjetos.
3. Observar cuidadosamente en el microscopio
4. Dibujar las respectivas observaciones
b. MUESTRA SÓLIDA
1. Tomar una colonia de bacterias con la ayuda de un asa microbiológica y teniendo cuidado de no romper el agar de cultivo.
2. Expandirla en un portaobjetos y cubrirla con un cubreobjetos.
3. Observar cuidadosamente en el microscopio.
4. Dibujar las respectivas observaciones.

6.2. TINCIÓN SIMPLE/ COLORACIÓN CON AZUL DE METILENO
1. Tomar una alícuota de las muestras sólidas o líquidas.
2. Hacer un frotis y dejar secar o tres minutos, o en su defecto flamear sobre el mechero (no excesivas veces, podemos dañar la estructura de las bacterias).3. Coloree el frotis con azul de metileno o con safranina.
4. Dejarlo reposar por 1 minuto.
5. Lavar con abundante agua destilada.
6. Secar con un papel suavemente.
7. Observar cuidadosamente en el microscopio.
8. Dibujar las respectivas observaciones.

6.3. TINCIONES DIFERENCIALES: TINCIÓN DE GRAM
1. Tomar una alícuota de las muestras sólidas o líquidas.
2. Expandirla en un porta...