Tincio n de Gram

Tinción de Gram

a) Fundamento
Desarrollada por el doctor Christian Gram en 1984. Permite, de acuerdo con la estructura y grosor de la pared bacteriana, agrupar a las bacterias en Gram positivas yGram negativas.
Las bacterias que son Gram positivas, poseen una pared gruesa de peptoglicano y carecen de membrana externa, mientras que las Gram negativas tienen una capa mas delgada depeptidoglican y poseen una membrana externa.
Algunas bacterias se conocen como Gram variables, ya que presentan tinción de Gram positiva y Gram negativa simultáneamente. Sin embargo, en su estructura estasbacterias poseen una pared de Gram positivas, aunque la capa de peptoglican es mas delgada que la mayoría de las Gram positivas. Ejemplo: Clostridium Perfringes.
















Esta imagen va en lasprimeras diapos cuando explicas estructura.












Esta tinción, además correlaciona con otras propiedades como endotoxinas, susceptibilidad a antibióticos, sensibilidad o resistencia a salesbiliares, punto isoeléctrico o tensión superficial.

Las utilidades de la tinción de Gram son:
Identificacion de una bacteria que causa infecciones.
Control de calidad del aislamiento bacteriano
Se distinguenmorfotipos de bacterias


b) Procedimiento

Pasos a seguir para la tinción de Gram:
I. Tinción inicial:
Las células de tiñen con cristal violeta, el cual es el colorante primario. (En este paso,todas las células se tiñen de morado)
Esperar 1 min. Lavar y escurrir.

II. Mordente
Se adiciona Yoduro (lugol) que reacciona con el cirstal violeta y forma un complejo cristal violera-yoduro. En estepunto todas las células continúan de color morado. Esperar 1 min.

III. Decoloracion
Se adiciona un solvente no polar, el cual actua lavando el complejo cristal violeta-yoduro de las células Gramnegativas. De esta manera, las bacterias Gram positivas continúan de color morado y las Gram negativas quedan incoloras.
Este es un paso crítico en el proceso, pues si se adiciona demasiado solvente (si...