Tincion De Sudan Black B

SISTEMA DE TINCIÓN SUDANBLACK B

APLICACIÓN
El sistema de tinción Sudan Black B de Sigma-Aldrich se utiliza en la demostración
histoquímica de gránulos neutrófilos en frotis de sangre o médula ósea. El sistema de
tinción Sudan Black B es para uso diagnóstico in vitro.
Varios lípidos, incluyendo los fosfolípidos, las grasas neutras y los esteroles, se tiñen
intensamente con Sudan Black B.La reacción de los gránulos neutrófilos con el tinte fue
descrita por Sheehan y Storey en 1947. Generalmente, el patrón de tinción leucocitaria de
Sudan Black B es parecido al de la mieloperoxidasa2. Las células que se encuentran a lo
largo de las vías linfáticas muestran una tinción negativa, mientras que las formas
mieloides y monocitoides muestran las reacciones positivas características.Por lo tanto,
Sudan Black B está considerado como un auxiliar útil en la identificación de las leucemias
mielocíticas y mielomonocíticas2.
Los métodos antiguos utilizaban una fijación de vapor de formaldehído en los frotis de
sangre2, técnica que puede dar como resultado una pérdida celular y artefactos de tinción.
El procedimiento de Sigma-Aldrich utiliza un fijador de glutaraldehído tamponadoy un
tiempo de incubación más corto, lo que da como resultado una excelente tinción sin
pérdida celular ni distorsión3.
REACTIVOS
REACTIVO DE TINCIÓN SUDAN BLACK B, número de catálogo 380-1
Sudan Black B, 0,18 % (p/v), en 69 % de etanol y con fenol tamponado con fosfato.
SOLUCIÓN DE HEMATOXILINA, GILL Nº 3, número de catálogo GHS-3
Hematoxilina certificada, 6 g/l, yodato sódico, 0,6 g/l,sulfato de aluminio, 52,8 g/l,
y estabilizante.
SOLUCIÓN DE GLUTARALDEHÍDO, número de catálogo 380-2
Glutaraldehído, 4 % en tampón borato, pH 7,6.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD:
Almacenar el reactivo de tinción Sudan Black B a temperatura ambiente (18–26 °C).
La etiqueta del reactivo indica la fecha de caducidad.
Almacenar la solución de hematoxilina, Gill Nº 3 a temperatura ambiente (18–26°C),
protegida de la luz. La etiqueta del reactivo indica la fecha de caducidad. Filtrar antes de su
uso. Se recomienda devolver el material a su envase original después de su uso. Desechar
si la solución se vuelve marrón (sobreoxidación por aire) o púrpura (pérdida de acidez).
Almacenar la solución de glutaraldehído en el frigorífico (2–8 °C). La etiqueta del
reactivo indica la fecha decaducidad. Desechar si presenta turbidez.
La solución fijadora de glutaraldehído es estable durante varios meses si se almacena
en una botella de vidrio cerrada herméticamente y guardada en el frigorífico (2–8 °C).
PREPARACIÓN:
Preparar la solución fijadora añadiendo 25 ml de ACS o acetona de grado reactivo a
75 ml de solución de glutaraldehído, número de catálogo 380-2.
PRECAUCIONES:
Se debenseguir las precauciones normales ejercidas en el manejo de reactivos de
laboratorio. Deshágase de los desechos observando todas las normativas locales,
regionales y nacionales. Consulte la Hoja de datos de seguridad del material para obtener
cualquier información actualizada sobre riesgos, peligros o seguridad.
Declaración de riesgos y seguridad (EE.UU.)
El reactivo de tinción Sudan Black B esINFLAMABLE y PERJUDICIAL. Altamente
inflamable. Perjudicial por inhalación, por contacto con la piel y en caso de ingestión.
Perjudicial: posible riesgo de efectos irreversibles por inhalación, por contacto con la piel y
en caso de ingestión. Irritante para los ojos, sistema respiratorio y piel. Mantener alejado
de las llamas – no fumar. En caso de contacto con los ojos, enjuagarinmediatamente con
agua abundante y buscar atención médica. Usar ropa protectora adecuada, guantes y
protección para los ojos y el rostro.
La solución de glutaraldehído es TÓXICA. Perjudicial en caso de ingestión. Tóxica por
inhalación. Irritante para el sistema respiratorio y la piel. Riesgo de daño grave para los
ojos. Puede causar sensibilización por inhalación y contacto con la piel. En caso de...