tincion simple y selectica





LABORATORIO MICROBIOLOGÍA GENERAL

PRÁCTICA 3
“TÉCNICAS DE TINCIÓN SIMPLE, DIFERENCIAL Y SELECTIVA”











INTRODUCCIÒN
La gran mayoría de los organismos unicelulares son invisibles para el ojo humano, por lo que es necesario el uso del microscopio para poder observar a estos seres vivos.
Para poder efectuar esto, es necesario que dispongamos de un adecuado aumentode la imagen (GAMAZO, 2005), esto se logra preparando los microorganismos, sometiéndolos a una tinción; para poder realzar de manera específica determinadas características morfológicas o estructurales de las células microbianas, además que nos sirve para identificar y clasificar estos organismos.
El termino tinción significa simplemente colorear los microorganismos con un colorante que destaqueciertas estructuras. Sin embargo antes de teñir los microorganismos se los debe fijar (adherir) al portaobjetos. El proceso de fijación produce la muerte de simultánea de los microorganismos y su adherencia al portaobjetos. (Tortora Gerard J., Berdell R. Funke y Case Christine 2007)
Tinción simple: Consta de una solución acuosa o alcohólica de un colorante básico. Su propósito fundamental esdestacar el microorganismo completo para que se vean las formas y las estructuras celulares básicas. En ocasiones se agrega una sustancia química, la intensificar la coloración; a este aditivo se le conoce como mordiente, y una de sus funciones es aumentar la afinidad de una muestra biológica por un colorante; o tal vez cubrir una estructura (como un flagelo) para darle mayor espesor y facilitar suobservación. (TORTORA et al 2007)
Tinción diferencial: Estas reaccionan diferente con respecto a las tinciones simples, frente a las bacterias, es por ello que se usan para hacer una distinción entre ellas. Las tinciones diferenciales utilizadas con mayor frecuencia para bacterias, son las de tinción Gram y la tinción acido-alcohol resistencia.
La tinción Gram fue desarrollada por el bacteriólogodanés Hans Christian Gram en 1884 y es uno de los procedimientos de tinción más útiles porque permite clasificar las bacterias en dos grandes grupos: gran positivas y gramnegativas. (TORTORA et al 2007)
Para esta tinción se utiliza el colorante violeta y el yodo, estos se combinan en el citoplasma de cada bacteria y lo colorean de violeta oscuro a purpura. Las bacterias que conservan este coloraun después de agregarles el alcohol, se clasifican como gran positivas; y las que pierden este color gran negativas.
Tinción de acido-alcohol resistencia, esta tinción se fija de modo firme solo a las bacterias que poseen ácidos grasos en su pared celular. Los microbiólogos utilizan esta tinción para identificar a las bacterias del genero Mycobacterium.
Tinción selectiva: Se utiliza paracolorear y aislar partes especificas de microorganismos y para detectar la presencia de capsulas, endosporas y flagelos.
Tinción negativa. Utilizada para demostrar la presencia de capsulas. Como estas no aceptan la mayoría de los colorantes aparecen como halos no teñidos alrededor de las células bacterianas y se destacan contra un fondo que contrasta.
Tinción para endosporas. Se usa para detectarendosporas en las bacterias. Con ayuda de el colorante verde de malaquita, ya que este penetra en el interior de las endosporas y las tiñe.
Tinción de flagelos. Se usa para demostrar la presencia de flagelos. Se utiliza un mordiente para aumentar los diámetros de los flagelos hasta que puedan visualizarse por microscopio.
OBJETIVO
Que el alumno aprenda las técnicas de preparación de frotis, fijacióny tinción más utilizadas en el estudio de microorganismos de cultivos microbianos.
Obtener la información básica para hacer la descripción inicial de los microorganismos

MATERIALES
Por equipo
Por grupo
1 probeta de 100 ml
1 vaso de pp de 100 ml
2 mecheros de Fisher
2 asas de inoculación
10 portaobjetos
1 parrilla de calentamiento con agitación
1 gradilla
1 piceta con agua...